分离血液单核细胞离心后上层（血浆层）浑浊原因讨论

henryjia

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9 O) u- k0 R+ {) k; h如图所见：0 [) K) N& u3 [3 n  z. V- B  M
小猪血液1：1 PBS稀释后密度梯度离心。离心后上层（血浆层）浑浊， 没有清晰的单核细胞层。同样方法以往多次使用只有一次出现类似状况。请教是什么原因造成的，提前谢过！

随时准备下线

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1、我遇到过上层浑浊，老师说是含脂类物质过多，具体原因我也不清楚。但是单核细胞层都是有的，只是分层不清楚，略微偏下。
  u. a4 c5 n. Y0 F2、你的离心时间和转速可能需要加大些。仔细看，你的单核细胞层应该是有太多红细胞没完全富集到管低，细胞分离液层都不清楚，仍然有不少红细胞。& u' L1 \  g  V+ @( K
3、想问下你的血是放在4度的？或者淋巴细胞分离液放的4度？我觉得应该在室温下进行分离，试剂等得恢复室温，温度影响淋巴细胞分离液的密度。% y, X5 q- V% b$ G; v1 [+ u
     实在不行就换一个吧！这一般都是个例现象。

chimo100

1、这个和分离液品牌也有一定的关系，一般GE的和CORNING的分的都还可以；
: |% C, E" x5 e% x2、如果用50ml离心管分离效果不好的话，可以用15ml的管子；
3 R3 J+ z, {$ U" z( |: I3、分离液与血要1:1加，分离液加的少也不容易分开。

lyj-0017

回复 henryjia 的帖子
+ O3 J' i2 k/ m5 X& y4 i! k5 X( {0 b" P
你这个是乳糜血或者患者在采血之前输注过脂肪乳吧？这样的话只能在分离前加倍稀释血液，吸取白膜时尽量在界面那个位置，能吸多少算多少

panda2333

应该是血液中含脂过高导致的·····

henryjia

多谢各位指点!