请教各位老师有关collagenase

baby00000003

请教各位老师，
4 C8 |) f' G. q+ Q如果用于组织消化，含有collagenase的缓冲液需要特别加入Ca2+么？
% p! y& h1 L' n比如，sigma网站上的trouble shooting说，5mM的Ca2+是这种酶活性最好的离子环境，: Y% Y# ]" v2 o' J" |  c# s4 Q/ G* O& J
但一般用于冲洗、缓冲的缓冲液都是不含Ca2+的，
9 z7 ~* y/ z9 a+ l4 V是否先用无Ca2+的缓冲液洗涤，再用特别添加Ca2+的缓冲液配collagenase消化效果是最好的呢？

nichifanlema2

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$ h8 E9 c7 m% @' Q% M% D9 N/ W4 d消化多能干细胞的话，collagenase可以用基础培养基配制，如DMEM等。配好后分装冻存在-20度。1 S2 e0 d5 n# @4 y$ T+ ]6 U

ytumuyangren

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- o: ?7 K4 R8 |+ j9 p' x. c6 ~. i: j4 x9 x% a
不用那么麻烦啦，消化下来的细胞用什么样的培养基培养就用什么样的培养基溶解collagenase，如楼上所述配好分装后直接冻存-20度，但是切记配好后的collagenase是储存浓度哦！