请教各位老师有关collagenase

baby00000003

请教各位老师，
7 d5 b: p8 C: A( ^2 {3 B" G如果用于组织消化，含有collagenase的缓冲液需要特别加入Ca2+么？
- p( _- @- F7 H7 h比如，sigma网站上的trouble shooting说，5mM的Ca2+是这种酶活性最好的离子环境，
# o+ V5 U0 @: ~; Q1 m* o' G但一般用于冲洗、缓冲的缓冲液都是不含Ca2+的，. t* S' t" j. y' x1 Q4 n
是否先用无Ca2+的缓冲液洗涤，再用特别添加Ca2+的缓冲液配collagenase消化效果是最好的呢？

nichifanlema2

回复 baby00000003 的帖子9 ~: u1 R. a# H4 G

( c# I1 |. T! D消化多能干细胞的话，collagenase可以用基础培养基配制，如DMEM等。配好后分装冻存在-20度。& _% i( w2 _; e: k* k

ytumuyangren

回复 baby00000003 的帖子) T& ?! L) C+ z; |
+ D) y7 W7 t7 _9 A0 S+ t
不用那么麻烦啦，消化下来的细胞用什么样的培养基培养就用什么样的培养基溶解collagenase，如楼上所述配好分装后直接冻存-20度，但是切记配好后的collagenase是储存浓度哦！