求助:鼠胚胎干细胞容易分化是怎么回事 - 胚胎干细胞专区干细胞之家



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查看: 47114\|回复: 23	go 求助:鼠胚胎干细胞容易分化是怎么回事 [复制链接]

wqcyqy0811

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发表于 2011-6-1 09:54 |只看该作者 |正序浏览 |打印

请大家帮忙分析一下：鼠胚胎干细胞生长第二天长的还可以，但到第三天就有许多死细胞飘起来，细胞状态也不好，轮廓不清楚，感觉是分化了？可能是什么原因？我的培养基是15% Hyclone 胎牛血清，1%P/S，1%NEAA，1%L-G，1‰β巯基乙醇，高糖DMEM培养基，10ng/ml LIF.

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jjjk127

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24楼

发表于 2011-12-7 14:14 |只看该作者

我们用的是gibco的knockout DMEM 和ES-FBS,如果mef状态好的话，mESC长的还是很好的

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friendly0722

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23楼

发表于 2011-11-28 15:02 |只看该作者

好像文章上所提到的es培养体系都是15%fbs或者15%ksr吧

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majing217

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22楼

发表于 2011-11-23 10:24 |只看该作者

用低糖的DMEM的，饲养层的质量也很重要。% V$ o# D2 U! P8 s3 u

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yangpan521

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21楼

发表于 2011-11-23 09:23 |只看该作者

昨天师兄给我看了一下小鼠胚胎干细胞R1也出现了类似的情况，初步怀疑可能是饲养层的问题，它使用的是20%的血清，其他因子和大家的一样，还有完全照搬文献所说做法的来养细胞是行不通的，要根据自己实验室的情况（有的实验室各方面都达到一流，有的连最起码的层流都谈不上）来选择合适的培养基，但最根本的原则还是要保证细胞的状态要好。