求推荐神经干细胞培养基或者因子

1125476931

求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现絮状物质，拿枪头吹也吹不散，三天后培养基中会出现絮状物质，絮状物之中有大量神经干细胞球，目前想换一种培养基对照一下，酶解的酶目前是用的TryplE

wm阿咪

回复 1125476931 的帖子
0 ~0 Z8 I/ L: s" V2 W4 \' ^. \% p/ A& [" [9 I9 `# L  P6 l
用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。

wm阿咪

回复 深海寂寞鱼 的帖子' p0 z( x& ?4 i* p
/ F0 r- e. ]  ?# W* h: ?+ @9 k
我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度，每次消化后单个细胞总是长不大了，然后就分化了。

深海寂寞鱼

1125476931 发表于 2017-1-16 14:47 ! O/ v  z9 f* D4 v# J. s9 f% Q
求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现 ...

$ D0 P6 B/ R2 E9 g请问你使用胰酶进行细胞消化的吗？
0 Y/ Y, S2 G' Z( J  Y
3 z2 f8 V$ X" J- F# d- c8 i就你描述的情况来看，感觉像是消化的稍微有些过，导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个：3 y9 W* s0 k/ \0 ?. a8 g
1. 如果科研经费不成经费，建议考虑换成Accutase进行细胞消化。9 q0 {* E3 a" y( F
& i9 ~& U: ^3 V+ K; t2 C
2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶（具体浓度我忘记了，你可以查一下资料），这样可以消除絮状物l了。
0 x! a" S- {+ {/ T" |    还有如果是用胰酶消化的话，消化时间不宜太长，消化后吹打不要力量太大。
/ N# ^9 O- L+ R* @! ?
& J1 W: }% e& k! D, v1 |7 `此外，神经干细胞不是非要通过酶消化法传代，机械吹打也可以用来进行传代，只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要，来选择传代方式。
, f; d5 d6 L8 \6 N
- D* l  ^  X+ q8 S' W4 c2 H% W有问题多多交流。