脐带血间充质干细胞提取

Life_Tech

分离液我用过好几种，Axis-shield公司，Sigma的Histopaque®-1077，还有一种国产的，GE的没有用过。三种都是分得出来的，国产的相对来说差一些，分界不是特别清晰，但是也能看到白膜层，Axis-shield公司的我用下来是最喜欢的。用15ml的塑料离心管，50ml的塑料离心管及10ml圆底的玻璃管都做过，做下来的效果是玻璃管最好，15ml的塑料其次，50ml的塑料离心管是最差的，分界不是很清晰。当时离心时应该是没有用刹车。希望对你的实验有帮助。

小公

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1 U+ _$ R' V4 f
, m# O# R9 I( u3 |+ Y( \你好，是的，是没有刹车的，都设置为0，请问你是血和PBS 1比1 稀释之后，再加分离液分离的吗？  

evial

我们不用稀释，直接加，照分离液说明书操作，连外周血也能分离到单核细胞呀。

evial

为啥很多人做实验时不先看看每个试剂的说明书呢？是英文不好还是不在乎？每个试剂老外都有自己的设定操作条件，照做就是了，老外的东西都是经过自家摸索条件后提供的标准方案，除非哪家杂志发表了新的更好的方案。

小公

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8 u- M( f7 W! E0 e* T8 R3 E4 X  [! ^5 J3 a+ a0 g4 n5 a6 e0 T, o
你好，请问你什么分离液？ficoll 还是picoll。多少血？

Life_Tech

回复 小公 的帖子3 s: O1 w7 w8 m% |6 b- t7 U2 l" E

' z9 u% F4 x* m* i我以前做的时候是买的采血袋收集的脐带血，采血袋里面本来就有液体，所以没有再用PBS稀释。你可以问问用其他方法抗凝的人是否有稀释过。

deshenglll

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" _3 n) P% W' \. Z& [& [3 O2 i+ x" ^( ~
血的质量咋样?还有就是淋巴分离液和血的比例是不是不对啊?