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EB不贴壁 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-3-29 08:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,本人在做小鼠iPS的悬浮EB三天后将其转入6孔板中(预铺明胶过夜),第二天晚上去看都还没有贴壁,心想估计是培养基太多的问题,结果今天早上去看了还是没有贴,请教有经验的朋友这是什么原因,是培养基太多还是细胞状态问题,或者是板子问题?谢谢!
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沙发
发表于 2012-3-29 13:13 |只看该作者
你可以试着改变培养基的量 或者是换成其他的板子 或者是改变基质 例如PDL或者是Lamin做一下对照 就能找到是不是细胞状态的原因了
$ T* C1 J) b7 ^/ ?( w
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藤椅
发表于 2012-3-29 23:30 |只看该作者
回复 lingminliang 的帖子- J/ V( q2 e% D8 i+ b# u' q6 t
( W2 D2 @9 u: z+ }! ^* H3 l
好的,请问你在EB从悬浮转至贴壁培养板中时,是一个一个EB转的还是统一一起吸了转移,一起处理会不会对EB形态产生影响?
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板凳
发表于 2012-3-30 16:58 |只看该作者
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一起吸了转移,影响不大
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报纸
发表于 2012-3-30 17:19 |只看该作者
回复 ligangtiancai 的帖子
. J5 G8 I8 g! f7 q! k: y
- ~" |/ ]+ A8 X" B$ k( S你的EB的状态怎么样啊?如果球形边缘有很多死细胞的话,EB就很难贴壁了
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地板
发表于 2012-3-31 10:41 |只看该作者
回复 ligangtiancai 的帖子
+ C2 r0 ]& R. F0 G
" W: Y; r+ w% v/ l+ R肯定跟培养基量没关系,EB3天挺大挺重了,很容易自然沉淀的
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发表于 2012-3-31 12:19 |只看该作者
回复 shangchunhua 的帖子3 k& w  r% z9 L, [! h  _
8 n1 V8 Y( L; `& Q: j  g
是有死细胞,边缘感觉不平整,这是什么原因呢请问?

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发表于 2012-4-1 12:33 |只看该作者
回复 ligangtiancai 的帖子
3 F; w8 p0 C4 Q" x+ X* ^2 u/ r" N' R, Q& m
可能是营养不足,或是被污染了,ES的质量也很重要
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发表于 2012-4-1 13:16 |只看该作者
回复 shangchunhua 的帖子
- g) n7 u, n! L
! A) O6 m/ T( V/ Y8 G7 K4 e营养不足应该不会,因为相对于培养基而言细胞量比较少,污染的话我也再考虑,但是也不敢确定,培养基也没浑。会不会是因为iPS在诱导EB前已有很多分化的细胞影响了EB的状态呢?
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