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楼主: xiao6tao
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[请教] 胰酶中加EDTA什么作用?   [复制链接]

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发表于 2010-11-19 01:01 |只看该作者
直接用胰酶吹打 细胞不好吧  再说最好还是离心
) E, ^" i* f$ ~+ W; g& u虽然你后加的培养基中会带有血清去竞争终止胰酶对细胞的作用
$ x( V0 f9 M9 s2 p/ N3 f但个人感觉 还是别冒这个险  
' U" R% `0 h) i0 G1 e' }- D2 m' O( M0 A实验 千万别怕麻烦   越怕麻烦 越麻烦  个人经验仅供参考
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帅哥研究员 积极份子

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发表于 2010-11-20 11:03 |只看该作者
佩服,谢谢!

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发表于 2011-4-5 18:39 |只看该作者
回复 hawkyiger 的帖子
5 G( i& p8 n0 f$ x9 H! l6 m) `0 F# C, P! ?/ |+ [
可以加入胰酶抑制剂终止胰酶消化?
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发表于 2011-4-5 21:04 |只看该作者
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综合一下前面几位朋友的问答:
! U4 {8 e/ w; `% @! T1、胰酶(Trypsin)消化细胞是通过水解细胞间的蛋白质从而使细胞离散,其消化不同的组织或细胞作用时间不一样,有的只需要几十秒,有的却需要十几分钟。Trypsin消化细胞的活性还和浓度、温度有关,在pH8.0和37℃时,Trypsin的作用能力最强。& f# l1 }; E( I/ @, V2 M2 x2 D
2、Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制Trypsin溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+ 的HBSS或者纯净水(调节pH7.4),并且加入EDTA耦合金属离子。: D7 U6 e( ?" u* n, j% B
3、终止消化时,加入含有血清的培养基即可,因为血清中含有许多肽类小分子和蛋白质。
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发表于 2012-2-9 16:43 |只看该作者
EDTA是二价金属离子螯合剂,强烈赞同 王乾 观点
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发表于 2012-2-9 21:55 |只看该作者
现在市售的小瓶的(gibco)的胰酶里面都是带EDTA的
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