间充质干细胞原代细胞少

fm001982

培养皿对细胞贴壁有影响的，是否跟以前的一样？. v" ]4 z0 z' ?# K- ^# [
爬出的细胞少，可考虑将组织块在皿上晾干一段时间（半小时左右），在缓慢加入少量培养液浸润组织块，减少震动。0 Y" R/ C& u4 O0 k8 y8 }1 P
2到3天后补液，不要太多，能没过组织块就行，然后视具体情况半换液，全换液。
# d* Z. N1 E- c/ _. f) E最后，祝你好运。

eric1993

1、建议用当天的脐带，脐带的时间对原代爬出影响大
- p7 \- D" r, ^+ U2、培养基的量减少，前期尽量少移动，经验上是7d后观察第一次

swtarron

建议直接取华通氏胶，虽然分离时麻烦点，但是贴壁的效率要高一点；换液时间可以放到5天，因为前期基本上没有什么细胞，营养消耗不大；是不是可以不用加双抗，我们从来没有加过双抗也很少污染的。

yingfeixiang

回复 swtarron 的帖子6 U) N! U$ P+ q3 K

7 p4 v% |! `5 y, S恩，好的，试试

沙漠狐o0

怎么3天就换液了呢，我们这边是5-8天哦。
& J" c8 n# D) V感觉双抗加多了细胞爬出比较慢。
. p+ @6 ?3 p* e6 y2 n培养基有条件就换成别的吧。。。之前也用过DMEM，效果大部分时候不理想。。。

damowang

脐带处理过程中使用双抗，通常培养过程中就可以试试不加双抗。细胞在有抗生素情况下有些会长不起来。原代可以选择在见到细胞爬出来后才进行换液操作。