干细胞出现聚集生长的原因

袁小懒

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! o) y( @& W9 ~" K$ [. u最近换用了DMEM+10%FBS培养脐带间充质干细胞，发现细胞生长缓慢，传代后细胞明显变大，生长慢，无法达到高融合度，同时还发现细胞在皿内生长不均，出现有些部位无细胞生长的光斑，而有些则形成了聚集生长的细胞克隆，干细胞聚集生长是不是标明细胞有分化的倾向或已经分化了？各位高手指点！

小冬子

传代后细胞没有很好的混匀也会出现细胞重叠生长的情况，应该不是分化，这种情况下，将这皿细胞原盘消化原盘传一下，仔细混匀，再生长出来的细胞就很均匀，状态也不错。

袁小懒

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4 t# E* N6 {0 B; R, b# w- }1 N
2 e8 |; I" g' r9 @) H有没有其他可能原因啊？

lic126

个人觉得，还是在接种的时候  没有吹打均匀。导致局部生长密度过高，这一小块  明显就感觉是长过了的感觉。

小冬子

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( p% x, h. r- g2 K; \如果是原代细胞传代后出现这种情况的话，可能是有细小的组织块残留，从组织块周围爬出细胞

袁小懒

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& H( H9 j/ e7 n* K有道理！那如果不是组织块呢？

cx4236850

自我经验，你的培养基配置好后怎么保存的，如果放在四度那就不难理解了。。。

lic126

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' s: E9 R- H/ d: S- }8 B
& m$ a9 A; _5 W+ P我们平常培养基配置好后 都是放四度保存啊。需要使用前  会提前放置室温预热。

cx4236850

回复 lic126 的帖子# L2 D5 b/ J( a6 U  t1 a

% z3 q0 v8 ?8 N5 F( U0 F我最近比较配置好的培养基放四度和放-20度养细胞的效果，结果发现从-20度拿出来的培养基细胞长的更快，形态更好，四度培养基中包括谷氨酰胺等等重要德干性因子都会部分降解吧，反正这是我的一点经验，具体还看自己。。。

lic126

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) n9 y1 d8 |( g! M3 w: k
嗯，各有各的配置基质和保存方法啦。学习了。并且我们的培养基用得比较快 一般都不会超过一个月。所以4度保存，能满足我们的常规需求。