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多聚赖氨酸玻片如何处理?0 d( B$ C. _0 c' y& b
多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:; r6 \* v5 x- n, n2 S
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(1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
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$ d, ] Y' s3 E% f (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。6 U: o( Q/ j) D5 n
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(3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
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(4)取出后放在无尘的地方晾干。
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; h2 V; H4 C, b) c (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
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(6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。/ L. R. F7 z0 ^$ K* L3 G) K
( W8 F1 P# ~6 T5 k5 ]0 _: _' v (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
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固定的原理:* ?1 I- W5 V2 ~: N8 _$ C! h9 u
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细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。 |
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