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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑 # d2 n. Z4 q7 ~  N

+ n& |. F) `$ m4 {% `: _请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
( m; s+ }: S& T* a$ K8 j0 ?
多聚赖氨酸玻片如何处理?0 d( B$ C. _0 c' y& b
          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:; r6 \* v5 x- n, n2 S
. f" K, T( x; h% c, ^3 a- n
        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
3 @# g' {0 n- g! v( F' u# |( a, Q
$ d, ]  Y' s3 E% f        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。6 U: o( Q/ j) D5 n
% |; l: J" @8 }9 k9 U  d$ D' d# X: w
        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
  X. G& I+ F+ S1 P* {. L; Y6 C1 e+ O, y& _9 a
        (4)取出后放在无尘的地方晾干。
4 U1 \- Y4 f% w. u* W7 c' B
; h2 V; H4 C, b) c        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
. S% E# n! _% M6 G3 ?2 C. w9 }; `; ], Q
        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。/ L. R. F7 z0 ^$ K* L3 G) K

( W8 F1 P# ~6 T5 k5 ]0 _: _' v        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
6 K& F2 f! y3 o2 n0 c; Z' e5 F# b/ b5 U! R) n$ G$ L
! \' c  L# E% F# e' I' e
' l# j! v" O1 A6 L& M# E8 N
        固定的原理:* ?1 I- W5 V2 ~: N8 _$ C! h9 u
- o: o" T. n4 P; K
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
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wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑 0 ^- C: x) Q0 o9 t% ?) O

+ z% J: g# a7 ^回复 wf78365421 的帖子$ M4 `% Y( d1 ~7 T0 K
7 J3 N5 N1 p( Z, ?
谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子) Y* [$ s0 J; ^+ {8 d
" f/ i! C3 r' b6 n1 P
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样7 z  d) N2 S, V# ?* R, i. S

, h; M3 }7 k* o- [: K1 [9 k否则他会看不到

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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