请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

sunny.yc

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6 {# M: V1 p- i8 h/ `* n你在养外周血的时候，也加入FBS了吗？应该是自体血浆吧
4 d$ z; p3 |* Z$ M2 Y4 x) A9 K
你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种
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因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的

bloodroses

回复 sunny.yc 的帖子& A  p& _0 ~- w- T
, B  e: l% t3 Q, r
养外周血的时候，是用的国产无血清培养基，没有加血浆或者血清。' b" _8 S: b1 \( k2 L; q$ I2 E' N
养脐血的时候，不加血清，只加10%FBS，或者只加10%自体血浆，都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。

kiss2346

做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血，少部分脐带血，个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了，你的外周血是正常人的吧？个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大

bloodroses

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  P' Y/ D! V3 F' h- |
9 V9 H- t: S  E' n1 l外周血是正常人的血，没有炎症也没有癌症。
1 {: L# a# q. X  \1 s) \1 c请问你用的脐血，采血量是多少啊，血袋是多大容量的，抗凝剂是的成分和量是多少啊？4 I* r: ^+ q- E( l) f5 }
谢谢。

kiss2346

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9 |/ T' X0 h# l' {3 V$ z
4 h" d7 H  H/ V  w, X5 S! x* T一般脐血采血量在100左右，分离单个核大概在1.5*10~8左右 ，血袋容量是200的，抗凝剂是肝素钠

gejianyun

我想请教下，培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2，还要不要添加了IL-1和CD3？

wind789

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
: w9 z) e6 L4 l. d" Z7 t小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。( m, E, ], U& m6 |! _, l0 a
诱导 ...

* `/ o3 J" k. q" `7 V
楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊？一般在室温放了多久才开始分离的？

bloodroses

回复 kiss2346 的帖子" s+ V; c; Z' @, ~
7 T) u* V6 C- M5 O! E2 G$ `5 K# Q
非常感谢您的回复。

bloodroses

回复 gejianyun 的帖子5 W; V+ f7 y  `6 r
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换液的时候，我只加了IL-2

bloodroses

回复 wind789 的帖子
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" t; e5 s" `# S0 m9 r7 e6 A/ i用的是200ml血袋，抗凝剂是枸橼酸钠，采血量大概60~80ml（含28ml抗凝剂），一般室温放置30~60min后开始离心。