请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

sunny.yc

回复 bloodroses 的帖子0 {( Q& h! C4 F1 W/ k

. h) `: `$ J5 I2 Y, C  x你在养外周血的时候，也加入FBS了吗？应该是自体血浆吧
& A: A' \  f' n9 E" a: K+ U4 v. _: X8 K6 l4 z
你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种. ~& e! v5 W5 i% X
$ u/ O3 X$ Q  U$ ~& W0 ?, z; }
因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的

bloodroses

回复 sunny.yc 的帖子
5 f; v# B! f% X* O4 u8 `/ m* o/ S1 O
养外周血的时候，是用的国产无血清培养基，没有加血浆或者血清。' o/ N2 d  E9 [9 j# D+ P
养脐血的时候，不加血清，只加10%FBS，或者只加10%自体血浆，都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。

kiss2346

做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血，少部分脐带血，个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了，你的外周血是正常人的吧？个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大

bloodroses

回复 kiss2346 的帖子$ U3 A7 m' O, ~; d" `

* C9 ]8 f# E7 U: j外周血是正常人的血，没有炎症也没有癌症。8 I1 w- |8 C( H  k: m
请问你用的脐血，采血量是多少啊，血袋是多大容量的，抗凝剂是的成分和量是多少啊？
( w; {% g7 c2 s9 b3 p$ C# u: V! P' P4 ^谢谢。

kiss2346

回复 bloodroses 的帖子1 f  C$ P8 i! N2 A/ V2 F
# v! p8 \9 v1 p: O7 m) _* i
一般脐血采血量在100左右，分离单个核大概在1.5*10~8左右 ，血袋容量是200的，抗凝剂是肝素钠

gejianyun

我想请教下，培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2，还要不要添加了IL-1和CD3？

wind789

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
4 `, m5 i8 j3 ^" q, E小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
5 U: i: I- L7 a; V" j; ^, c+ j诱导 ...

# _0 B0 d" ]) D# X" {8 Z
楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊？一般在室温放了多久才开始分离的？

bloodroses

回复 kiss2346 的帖子+ l2 u4 w' _- t4 Y* B; Y

) r3 D& p' b7 d& I* \  \- r- {非常感谢您的回复。

bloodroses

回复 gejianyun 的帖子4 p: |6 B/ X2 o1 [# r6 C) w

) F2 d4 n/ V4 }: N% _# k% _# i换液的时候，我只加了IL-2

bloodroses

回复 wind789 的帖子' N( b; Q1 n3 z3 V- ?( @+ f' K4 a) |

* {" V. J+ _, @. h+ h用的是200ml血袋，抗凝剂是枸橼酸钠，采血量大概60~80ml（含28ml抗凝剂），一般室温放置30~60min后开始离心。