大家帮忙看下人源MSC的状态吧。谢谢

michael1013

. _# b9 Q! s; J2 A

+ j1 G+ Y$ ?# c( V" i7 I如下图所示，就形态来看 这些人脐静脉MSC（P3复苏后第9天）的状态怎么样。或者说是不是分化了。. x# c1 @( M- d$ {
因为初次接触MSC，请大家指点一二
! x9 O, {' z2 G, }7 A9 l多谢了
4 P' ]5 G$ \  V7 D( |4 [0 P
' y3 q; J' Z- [2 d; _8 g2 o" T1 U  @7 B2 M$ x  L

sailree

用的是什么培养基？如果是血清培养基一般来说传到后面细胞都会很丑，如你图一般。建议你换无血清培养基。lonza等

sailree

用的是什么培养基？如果是血清培养基一般来说传到后面细胞都会很丑，如你图一般。建议你换无血清培养基。lonza等

michael1013

回复 sailree 的帖子
* N! n, u; Z) c  Y: d& w* b0 m2 u2 e: `
用的alpha-MEM+10%FBS, K4 J7 X0 ~$ w  }( T; x7 x, N
这些细胞是老化了吗

michael1013

回复 sailree 的帖子
& c0 }0 X* @: K0 }: v
' ?) E8 h! E+ c能不能拜托说稍微具体一点。lonza的哪个培养基，另外还需要添加什么成分

小刀

我没有养过这种细胞，不过看起来是老化了。

zttamy

回复 michael1013 的帖子' X# w6 V/ w8 U$ @! L
4 b5 T+ p: q3 z6 F! f
会不会是复苏时接种密度太低了？有及时换液不？

zttamy

P3代年轻得很，不应该这么早出现老化的

sailree

那就对了哈，胎牛血清培养p3代出现这个情况比较多哈，换lonza的人间充质干细胞无血清培养基。你可以到网上搜一下就出来了。对了血清转无血清时，有个驯化过程，刚转的一代细胞会长的不是很好，传代后就正常了。接种密度最好控制在8000~12000个/cm2.

sailree

) t! E4 N0 Z9 a- c4 u

- e) i4 U. t4 ^还有GBICO的人间充质干细胞无血清培养基，需要铺基质。lonza 和gibco价格也不便宜。你也可以找点国产的来做。可以做个比较，国产的我没有做过，不知道效果怎么样。