请教组织块如何很好地贴壁

细胞海洋

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liucong

回复 chb611301 的帖子! G: _" n+ V7 `$ v7 q+ h

3 P5 X7 G: f& L( S6 p# d3 l$ `你好！请问你们做脐带间充质干细胞是用什么培养基？用外加其它成分吗？

liucong

回复 death0270 的帖子
* X1 y0 N# w! ^( T
+ E9 ?+ f0 k- u) n3 u3 K; K  p请问，培养过程中始终保持培养瓶中的培养基为1ml吗？

quge_00

回复 cactus006 的帖子" t2 \% R* i9 U' A- j

5 }1 ?$ M8 b$ k" I/ @我的细胞一般都两周左右才长出来呢~耐性等等。

quge_00

回复 cactus006 的帖子* z: r" J5 ?! p) N! s: I$ x

- _6 S( U- P% f  e我的一般要2周左右才看见细胞，耐性等等~
: u. o4 D, W* Y; M; I  D脐带也有个体差异吧~~

huajie881026

cactus006 发表于 2011-6-18 08:59 6 s- p$ X9 ]  M
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% v3 O- _, F" w1 f5 D; Y+ h: M' N2 c7 {, i7 v
我用10cm的皿，每个皿只加2--3ml培养基，次日补液，大部分组织能贴壁；但是到现在已 ...

3 w% h7 [2 a& v/ Z5天还太早，可以再等等，一般7天会看到少量MSC，10天左右会多点！6 |/ ^! t4 H# A% ^
贴壁法的确是比较慢的

ld2069

新鲜脐带组织一般一周左右就可以爬出了，贴壁前先湿润培养瓶，T75加1.5-2ml,组织剪成小块后直接贴壁，注意处理脐带时需要用少量PBS湿润剪切。以后每天补液1-2ml。

透明之蓝

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/ R- z( a' M! b& r/ @9 |! G; F/ w# @. v: t
没那么快，做好2周的准备吧~~有的确实快，但是和脐带自身关系很大！

xylophone

回复 大少爷 的帖子+ F6 e7 q$ G: \, N+ E0 v

6 }% w+ u4 W$ n" B/ d+ L你好，看到你这个回帖：“我们实验室做脐带组织块时，先将其剪成1mm3左右的碎块，然后按重量接种，75cm2培养瓶，每瓶0.5g，加10ml培养基摇匀，静置培养，组织块贴壁效果较好。因为10ml培养基刚好可以覆盖整个瓶底，又不会太多，小组之快会很块贴壁”# s8 p/ d6 ]$ [3 m6 d& O

: h  O& K" U- z5 q1 d. s0 y3 Y; Y$ ~9 U我初来做这个课题，请问你什么培养基，加什么因子啊？谢谢

aibi1983

我们实验室在做脐带组织块法都是不倒置的，只需要将脐带胶样组织剪成0.5*0.5cm小块，大一点也没关系。然后PBS洗几遍，把胶样物质冲掉，然后均匀铺到皿底，先不放培养基在实验台静置5-10分钟，后轻轻加培养基不要没过组织块就放到培养箱。大概5-8天后才会看到少量细胞爬出，一般十几天后才可以传代。