吸取单个核细胞时（也就是吸取灰白色细胞层）的问题

shy8610

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土豆哥，你好，很高兴与你讨论，我知道我的文字表述能力有限， 是这样的，我们分PBMC是2种，1种是200ML健康人，1种是40ML病人的,一般先除去血浆，剩25ml的固体物，用无菌pbs调整到35ml左右，充分混匀，缓慢小心铺在15ml的fercoll上，形成明显分层，离心后，如果血液状态好的，是可以十分清晰看到白膜层，比较扁，我们用巴氏管就直接伸到白膜层，吸得控制，尽量多吸白膜层，可能适量混入上清，不可混入fercoll,为什么我说要边吸边上走。然后练手的事情嘛，我刚开始做的时候，吸不好白膜，就抽自己的血练，当然这个看个人，也可以拿实验样本练，看条件咯

shy8610

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1 T, c$ x$ L! O不好意思，再补充一下，等自己熟练了，你完全可能用电枪带着10ml的移液管吸，呵呵，我现在就这么干的，不影响效率，我们一般样本半夜到，通宵分血，一分就是40-60份啊，时间效率么问题，但言归正传，如果没把握，宁愿慢点，这是最重要的一步，对吧，关系到PBMC的得率

突击兵之小土豆

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" K. l; ^& ?9 Y. c) G强悍啊，谢谢分享经验

shy8610

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# l0 g/ S3 c& v$ Z3 d本来想加你为好友的，可惜啊，刚入门权限不够，无法操作

突击兵之小土豆

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呵呵  加你好友了  

shy8610

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, x7 T' X% M) e6 \# u7 b) G回复 突击兵之小土豆 的帖子
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9 Y0 ^( r/ M7 Q  O% I我无法回消息，留言，只有回帖的权限

vanessa

我们作为临床用的细胞，一般是沿壁吸的，吸取少量红细胞和血小板是没有关系的，因为它们会在后续的传代过程中被稀释。如果做科研用，可以沿中间吸，剩余少量淋巴细胞就不要了。