293T细胞团中央黑色不明物

telomerase

铺匀的方法有好多，个人有个人的% d( l, l: T! d5 m+ w% Y
1、晃板子，就是前后晃完，左右晃，然后突然停
" _/ L3 y# z' N& t3 Z+ a5 f2、先湿润板子，然后铺
4 s( ^9 e1 Y  R: P  j6 c; ~# ^( {8 f3、直接铺，然后用枪头吹- c+ ?/ ~  [2 A8 i7 k6 k  d
4、完全消化，直接加入，铺满底面就好4 H8 d. |  D$ ^
# q3 s( S- z" @% e7 {5 X4 {
8 T5 W. Z1 B; Q+ x; t8 X. a  R. o1 Z
这几种我都做过，但我比较喜欢第4种
+ J1 |& ]9 i3 a3 o! I- j! u0 i你得找到你自己觉得好的方法，这些是和各自的手法有关的，没有绝对的东西

telomerase

不加双抗的" g( l6 j2 Y  _
转时可以用有血清的培养基，但混合质粒和lipo的最好用减血清的opti mem

telomerase

转时不要加双抗，对细胞不好4 e# l! i! l6 n1 c
如果6h后换液，再加不加双抗没关系了就

sizhengliu

回复 telomerase 的帖子1 D9 K4 i  a' O$ z. b. W

4 u  E0 L* \! O; N. P: V& h: ]多谢指教！

huangcong1988

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. f  F. u) Q6 Z7 p9 B/ [, ]2 l% {8 n9 E( T9 s, G+ e  c( T9 z5 {
个人觉得是消化传代的时候没有吹打均匀，然后传到瓶里没有摇匀，这样细胞很容易扎堆，导致细胞形态不好，还有你的细胞哪里的？是不是传代太多了？

wcfeng88

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$ ^! Z, h* z3 e5 c* c2 [6 x5 ]+ T! s3 h
放置几分钟，细胞仅轻轻贴壁，你拿起放到培养箱的时候的动作肯定会把它们晃起来。你可以让它们贴个半小时让它们贴壁比较紧之后再去动它，或者直接在要放的培养箱里按照常规的方法晃匀后就不动它了。

wcfeng88

回复 sizhengliu 的帖子  O* F8 z1 c$ Q6 T  [/ o

+ y9 O" S0 }/ C; v* _质粒转染的时候不加血清，一般转染4小时之后把含质粒的转染液丢弃，再加入含血清和双抗的培养基培养就可以了。

sizhengliu

回复 wcfeng88 的帖子* {$ i$ [1 v7 p7 m3 B

. ^$ C$ w" C! J' F谢谢！

sizhengliu

回复 wcfeng88 的帖子3 u  m/ h+ g( C- D# _
1 \0 |. f, I( `3 Y) E
谢谢！我下次试试

sizhengliu

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' z' g0 k- L/ W
. p) C; U; o' B! |2 y我把细胞直接复苏到孔板里，或许这样太急了吧，以后可能会先在瓶里传个1、2代。