请教胚胎聚合方面的问题

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最近做胚胎聚合，可是胚胎一直聚合不上 ，我们在做的过程中发现，在去掉透明度后，仍有一层薄膜，胚胎一直聚合不上，想请教下这是怎么回事？! N/ z; q6 h6 k. N6 {0 ^

have-a-rest

什么胚胎啊，透明带怎么去掉的？

zpzp0312

通常来说，透明带是可以去掉的
1 N1 a) K* P4 `' A5 z如果遇到楼主这个情况应该是在去透明带时没有观察仔细
7 }; C: Z' ^& g% u/ S- W7 `$ ?" T7 y1 G你可以把那些看似还有一层薄膜的胚胎处理时间延长一些，“过处理”一下，让若干容易去除透明带的胚胎多处理一段时间，到时候可以淘汰不用。剩下的胚胎透明带应该大部分都去除了。
' z/ A/ F+ B' B4 W另外聚合过程中一定要在一个小的空间里进行- g* }& {5 S1 X' Z( j9 o
如果没有合适的工具3 ]& ]  F; H8 Y5 @2 G
也可以考虑使用一些促进细胞粘连的试剂& ^. d/ ?, n! b: I
楼主做的是ES聚合还是胚胎聚合（二倍体/四倍体）？: Z- O6 E5 {3 g+ A  e6 f9 r! y# H
用的ES细胞和胚胎的品系都是什么啊？

461650833

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3 Z* B+ B4 E! F$ I& r9 l
猪孤雌胚胎啊 用的是pronase

461650833

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- l1 n2 m# j8 v. M) Q: s
4 F- n: U6 ~  m) \8 A做的是猪孤雌胚胎聚合，做了几次都没有聚合上。
) D0 X" O  x/ A2 d, e你所说的小空间，可以是WOW培养系统吗？/ q9 X/ R2 \1 b
促进细胞粘连的试剂可以用什么，植物凝集素可以不？

zpzp0312

看来你那里的实验室配套设施应该挺齐全的8 M8 w$ N0 o6 ]' P! ^
说的都对2 f; ^5 h# X, U- h9 C; e3 k) f
目前似乎就是透明带处理有问题了，多处理一段时间，通常来说在镜下应该能看出来是否已经除去透明带。
( }- y9 J$ z! P$ w  F如果看不好就收集那些似乎沾到培养皿底部的胚胎，轻轻一吹就下来了。这样的胚胎透明带绝对已经去掉了！

461650833

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* X# y8 h. N( X1 @( `
我们试试多处理一段时间 看看效果