请教胚胎聚合方面的问题

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最近做胚胎聚合，可是胚胎一直聚合不上 ，我们在做的过程中发现，在去掉透明度后，仍有一层薄膜，胚胎一直聚合不上，想请教下这是怎么回事？& X1 I! b1 |8 c

have-a-rest

什么胚胎啊，透明带怎么去掉的？

zpzp0312

通常来说，透明带是可以去掉的
; k/ x2 i/ c! [# Z. }如果遇到楼主这个情况应该是在去透明带时没有观察仔细
' L4 I- e1 J  }  |+ ]! y你可以把那些看似还有一层薄膜的胚胎处理时间延长一些，“过处理”一下，让若干容易去除透明带的胚胎多处理一段时间，到时候可以淘汰不用。剩下的胚胎透明带应该大部分都去除了。
+ B6 [7 B7 ?1 w: C$ S  ^) ~另外聚合过程中一定要在一个小的空间里进行$ ?* c) W; S9 J/ L5 U  O
如果没有合适的工具
- u7 T' W2 q* ^% r& [/ X也可以考虑使用一些促进细胞粘连的试剂% m  E. x7 m! a$ y: ^: B0 n9 z$ \
楼主做的是ES聚合还是胚胎聚合（二倍体/四倍体）？& }+ I$ G. y4 {, M/ B) b+ J
用的ES细胞和胚胎的品系都是什么啊？

461650833

回复 have-a-rest 的帖子0 K' p- p7 w# o, |6 x. `

2 A$ f$ G- c& `0 x# \猪孤雌胚胎啊 用的是pronase

461650833

回复 zpzp0312 的帖子8 E8 X( D  C/ W) V. ~' T. Q1 Y6 G
: G+ u! E5 G. N2 G
做的是猪孤雌胚胎聚合，做了几次都没有聚合上。
; o$ I8 c/ M/ p4 y: g3 {你所说的小空间，可以是WOW培养系统吗？, p6 ^% A6 P/ z
促进细胞粘连的试剂可以用什么，植物凝集素可以不？

zpzp0312

看来你那里的实验室配套设施应该挺齐全的# W- q8 W: c. x% Z3 ]# E* {
说的都对4 b& z3 x( X5 G: C
目前似乎就是透明带处理有问题了，多处理一段时间，通常来说在镜下应该能看出来是否已经除去透明带。
. a  R3 |8 P( ~" f) |如果看不好就收集那些似乎沾到培养皿底部的胚胎，轻轻一吹就下来了。这样的胚胎透明带绝对已经去掉了！

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回复 zpzp0312 的帖子/ {/ ~4 q( R8 o: v$ k

' A4 n7 M& L5 O我们试试多处理一段时间 看看效果