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请教华通氏胶的剥离     [复制链接]

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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
剥胶确实是熟能生巧,练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的,有胶多胶少,有好分离不好分离,有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中,4度保存5、6天,质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。
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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
本帖最后由 lazyworm 于 2012-2-16 13:49 编辑 4 h2 j! U' X" G# T4 d/ F5 v& d4 e

" J# V* D7 u& F/ E9 t; x, z每当打开个网页,回复个帖子都慢的喘不过气啊。

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小小研究员

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发表于 2012-2-17 00:12 |只看该作者
回复 lazyworm 的帖子
0 c3 S! h# L- J
0 v; [* N8 \  B# P" v1 {经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

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发表于 2012-2-17 09:17 |只看该作者
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回复 细胞海洋 的帖子
5 T( C5 H! X1 ~! X6 `& E0 \. R) D
; P/ W3 {% @( r2 F6 h经常,可能是浏览量大的缘故吧,说明我们的队伍越来越强大了哈。

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发表于 2012-2-17 09:52 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
* B- |$ a3 h3 i$ s/ C& f4 J' Y* R% y% [& y1 W5 J
放4度啊,要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗!有缓冲液就行了,最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了,里面加双抗。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-17 10:16 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
) m. U7 ^7 n' Y% S' o0 p% p1 I* V0 n0 d) e& _( r% p- Q& n9 R4 A& P
从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进行处理。
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发表于 2012-2-17 10:57 |只看该作者
我剥过两次,仅做参考:4 g4 m# S! c% {4 i
: ?# l( W& d/ g2 ^- P# a6 u1.把脐带剪成小段,便于剥胶;: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L
# I+ y, Y# u; T2.纵向稍剪开外表皮,再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开,再进行两动脉和一静脉的剥离,该过程基本全是用镊子操作;! v" B) J3 h* L7 T
* \3 K5 M' V& ?& ~# c1 Y3.血管分离了后再剥胶,除去血管外,表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶;, n# {* Y, R( \0 G% j# z1 q; ]6 u# Y5 K! u
我们剥的胶是可以撕成条的,而且质地胶白,没有你说的粘粘的,估计是采样太久或没有保存好(具体的采样和保存我也不知道)3 D: n" G# p6 `
) Y, A, r" }; T1 n3 D只要把表皮撕开就好,不用剥离外表皮,直接把脐带摊开,再撕胶;6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?* [& z# Y3 k( l5 F3 ~- S
剥胶很费手劲,而且用力要恰当,撕胶的时候不要把表皮也带了;4 F+ C! Y4 F, @: t
# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥,静脉粗薄不好剥离,多操作几次就熟了  T" N  A4 o5 L1 ~& g/ r* B
" e% i- F  t% C
尽量剪成小段就ok了
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发表于 2012-2-20 16:38 |只看该作者
非常感谢大家的帮忙!

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发表于 2012-2-21 09:21 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16 0 P1 U- W" M2 f1 t0 R3 N! v0 o
回复 leungyk 的帖子8 O/ ?, c7 _6 U

" i. U& p! _) |. e* g( [7 k. t从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进 ...

9 T) h: h; L/ Z5 d1 V謝謝!
7 ]* P$ o$ ?: t* b0 V其實我做過個小小實驗,存放在PBS+雙抗中,室溫下12h也可以,但當然效果不是太理想!: V. y8 e$ k) o& u% g& m  h9 \
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发表于 2012-8-11 17:12 |只看该作者
为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢?
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