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扩大培养,摇菌到底要摇到什么程度 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-18 07:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
这几天真的是很不顺,不知道为什么,前几天一直做转化,结果板子除了问题,菌一直长得不好;近几天提质粒,结果昨天做的时候不小心碰倒了架子,所有做的都白费了,我又重新挑菌摇菌,结果昨天晚上摇菌的时候一个东西从摇床上掉下去了,卡主了摇床,不知道摇了几个小时,也没见菌液太浑,所以想问一下,摇菌到底要到什么程度就行了?一般说是14~16个小时,由于不知道摇床什么时候停的,所以现在我不能从时间上判断摇菌程度,我想问一下培养基浑浊到什么程度就说明菌摇好了,可以提质粒了?
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沙发
发表于 2011-8-18 08:51 |只看该作者
要是提取质粒,肉眼看,不透明了,一摇呈云雾状,5ml的菌液足可以提取40ul的质粒。还有测OD值的,但是一般实验室摇菌就是目测了。呵呵
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金话筒 优秀版主

藤椅
发表于 2011-8-18 08:58 |只看该作者
如果用的是透明的器皿摇菌的话,用肉眼看,从瓶的一边看不到另一边的刻度(一般器皿都会有刻度的吧)基本上就算混了,也可以放在四度冰箱沉淀1h后,看菌体的沉淀量就知道了
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金话筒 优秀版主 帅哥研究员 积极份子 优秀会员 小小研究员

板凳
发表于 2011-8-18 09:15 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
其实只要看到浑浊的菌液就行,不要摇老了就好。提质粒没这么高要求的。
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报纸
发表于 2011-8-18 09:17 |只看该作者
浑浊即可。。按照以前的经验目测啊。。没关系的。但是不能摇太久,抗生素会失效。。
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地板
发表于 2011-8-18 09:29 |只看该作者
LZ你的问题不是你不知道菌摇到什么程度吧,是你最近运气不好,都不敢相信自己的判断了吧!
, J1 v0 c2 N. ]; h" c+ a没关系的,相信自己!
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发表于 2011-8-18 10:14 |只看该作者
不用管摇了多长时间,继续培养就行。人家说的14-16h,我想一是怕抗生素失效引起杂菌生长,二是怕细菌培养太久给老化了。
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发表于 2011-8-18 10:14 |只看该作者
不用管摇了多长时间,继续培养就行。人家说的14-16h,我想一是怕抗生素失效引起杂菌生长,二是怕细菌培养太久给老化了,影响质粒产量。

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发表于 2011-8-18 11:32 |只看该作者
回复 懵懂干细胞 的帖子
$ Z8 P/ m" e! d9 }. q2 g! B# }/ B: @3 w3 {& ?2 ?/ K1 R
谢谢,非常感谢

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发表于 2011-8-18 11:32 |只看该作者
回复 xiangchou812 的帖子
+ v9 }4 G2 K, _; ]8 }# y- @0 g! n" K* U9 W7 \( e9 Z, R+ L* u
时间长了长杂菌
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