扩大培养，摇菌到底要摇到什么程度

huangcong1988

这几天真的是很不顺，不知道为什么，前几天一直做转化，结果板子除了问题，菌一直长得不好；近几天提质粒，结果昨天做的时候不小心碰倒了架子，所有做的都白费了，我又重新挑菌摇菌，结果昨天晚上摇菌的时候一个东西从摇床上掉下去了，卡主了摇床，不知道摇了几个小时，也没见菌液太浑，所以想问一下，摇菌到底要到什么程度就行了？一般说是14~16个小时，由于不知道摇床什么时候停的，所以现在我不能从时间上判断摇菌程度，我想问一下培养基浑浊到什么程度就说明菌摇好了，可以提质粒了？

rain2402

要是提取质粒，肉眼看，不透明了，一摇呈云雾状，5ml的菌液足可以提取40ul的质粒。还有测OD值的，但是一般实验室摇菌就是目测了。呵呵

yangpan521

如果用的是透明的器皿摇菌的话，用肉眼看，从瓶的一边看不到另一边的刻度（一般器皿都会有刻度的吧）基本上就算混了，也可以放在四度冰箱沉淀1h后，看菌体的沉淀量就知道了
, X' b( k( g- S! r( [
% q- W  o& I) k. y2 K
- q& M7 F9 M+ J) C
0 K$ n# o3 E2 d* N8 h7 A
% x% J: `8 o  v' N! C/ r# B4 m5 V" Z7 }/ c2 q

! t7 Z0 C" T+ X8 U- F1 d1 E. U1 j# `& K7 U1 A! A2 @/ R

) c/ [' k5 l- K4 Q. j% t! r# G/ v; A6 H

: E* \* f( b0 t: S" ^% }4 P0 c2 t0 v1 ?9 `: y7 |
1 m' e5 i, x1 Z9 y+ U7 Y
9 a* U# ?, F7 {; E6 O+ y. o6 d7 A
% p" M/ n7 E# z- J6 j: W
7 a- p/ E: S+ F% V/ k

$ N- E; d& i- y2 t1 n1 b4 i) g8 A5 ]9 r. U7 t

; w" D( b+ a) M( p  @' ?

amosummer

其实只要看到浑浊的菌液就行，不要摇老了就好。提质粒没这么高要求的。

sylar.wy

浑浊即可。。按照以前的经验目测啊。。没关系的。但是不能摇太久，抗生素会失效。。

懵懂干细胞

LZ你的问题不是你不知道菌摇到什么程度吧，是你最近运气不好，都不敢相信自己的判断了吧！
/ `- X( [( J. v+ [; q' n没关系的，相信自己！

xiangchou812

不用管摇了多长时间，继续培养就行。人家说的14-16h，我想一是怕抗生素失效引起杂菌生长，二是怕细菌培养太久给老化了。

xiangchou812

不用管摇了多长时间，继续培养就行。人家说的14-16h，我想一是怕抗生素失效引起杂菌生长，二是怕细菌培养太久给老化了，影响质粒产量。

huangcong1988

回复 懵懂干细胞 的帖子
; N% ]5 H" t1 [7 S8 H1 e7 _; N9 T9 R; A9 m# e' H# @! X3 `; M; x# a
谢谢，非常感谢

huangcong1988

回复 xiangchou812 的帖子+ i5 ~3 W2 M; E' y
4 E! x/ Z+ Q3 B
时间长了长杂菌