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病毒的收获及浓缩 b' X& m6 T9 _
（1)收集转染后48h（转染即可为0h计起）的293T细胞上清液。$ X, L3 ~: @0 ^( v6 M5 i
（2)于4℃，4000g离心10 min，除去细胞碎片。
( r# i- n9 n+ @" T4 N& a（3)以0.45μm滤器过滤上清液于40ml超速离心管中。- v$ u h# R9 `* e
（4)把病毒粗提液样品加入到过滤杯中（最多19 ml），盖上盖子。将过滤杯插
2 q U5 @! x+ i% C到滤过液收集管中。
1 `' m) D& x: n1 e5 Q0 E7 d（5)组合好后，做好平衡，放在转头上。
0 S% @: O X8 P& Q+ U2 p（6)在4000g离心，至需要的病毒浓缩体积。通常需要的时间为10-15min。
3 S% U, j0 c% I& `5 u（7)离心结束后，取出离心装置，将过滤杯和下面的滤过液收集杯分开。
4 z% X1 ~; v* { N9 f: o Z（8)将过滤杯倒扣在样品收集杯上。
4 Q& g8 w$ Z) T$ ? R% K（9)离心力不超过1000g,时间为2min。过高转速会导致样品损失。把离心杯从9 S$ h3 Q% n8 X( |* p4 }: B* ^
样品收集杯上移开。样品收集杯中的即为病毒浓缩液。, \) L9 S) l* T3 [+ d5 d
（10)将病毒浓缩液移出，分装后保存在病毒管中，-70℃长期保存。取其中一支
7 g. E! V, d& w5 r# C3 Q进行病毒生物学滴度测定。
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发表于 2011-6-11 22:05
