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求助:羊水原代培养(附图)   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-11-8 10:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-11-8 11:09 编辑
% L& \/ S* I; S' a/ L
& t8 |" @" n- M9 S1 M! A妊娠中期羊水原代培养,目的,分离鉴定得到羊水间充质干细胞。培养8天后,细胞培养皿中出现如下细胞,请教下,这些是我要的间充质干细胞吗?顺便推荐些需要鉴定的细胞表面抗原,打算用流式鉴定。谢谢
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沙发
发表于 2010-11-8 11:14 |只看该作者
哥们 羊水干细胞不是个好东西  趁早 洗洗睡吧

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藤椅
发表于 2010-11-9 08:22 |只看该作者
自己顶一下,看了别人的羊水干细胞图片,跟我的差好多啊,不知道我养的到底是什么,请高手指点,谢谢

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板凳
发表于 2010-11-10 09:20 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
自己再顶一下,看了别人的羊水干细胞图片,跟我的差好多啊,不知道我养的到底是什么,请高手指点,谢谢& z3 ]+ C$ J0 g  F/ @. n
本文来自干细胞之家  - 中国干细胞研究员的交流论坛http://www.stemcell8.cn,详情请看:http://www.stemcell8.cn/thread-29692-1-1.html

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优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2010-11-10 15:00 |只看该作者
首先,从图上没有办法定论是什么细胞,也没有见集落形成,所以可以怀疑不是干细胞;
5 Y6 L- R7 {- f0 y其次,间充质干细胞的鉴定也不能用一种方法就可以下结论的;( W% _, X3 `* q6 F
     建议把细胞传代一下,最好能把密度提高(可以合瓶,也可以放到小的培养器皿中,也可以把培养瓶倾斜培养等等),密度太低细胞的生长周期太长,容易变化。
2 s, H' ]5 ]: G/ T5 Y* g
* a: x% d1 @2 Z1 v7 {; z顺便说一下间充质的鉴定; b( b  ?9 R# d" R+ J
4 Y+ s2 t. C* ~- V6 Z: y* y1 L1 U
一、从形态上看,长梭形,漩涡状生长;- O; n& \& S& @) e% W& X
二、表型上CD44、CD29、CD166、CD90、CD73阳性,如果不全测建议可以测CD44、CD29;
9 R# ^0 c! C, P6 J三、免疫组化或免疫荧光测波形蛋白,波形蛋白阳性,测CK19,CK19阴性
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地板
发表于 2010-11-11 08:56 |只看该作者
学习了,谢谢!

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发表于 2010-11-18 13:56 |只看该作者
羊水来源的细胞贴壁的有三种:上皮样,成纤维样,还有就是羊水特异细胞,你的细胞形态多样是肯定的,如果纯化,就要免疫磁珠法最好
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发表于 2011-5-31 09:04 |只看该作者
这是我羊水原代培养得到的细胞,已经传到20代。7 W* K1 z3 P  S: v1 s- }
用荧光定量PCR做了几个鉴定指标:- Z' I3 m9 G: Z
       CD45,CD29,CD73,CD44,CD166,CD105,CD90,OCT-4 表达
2 x9 X. @1 O9 b7 e: {# Y    CD34,CD14 未表达
, k6 l% X6 ~; E  G: Z由于经费问题,没有做流失鉴定,三系分化鉴定也只打算做脂肪分化。
3 t! |: H% n9 _* W
6 Y/ q7 p( r# M' o各位培养过羊水间充质干细胞的前辈们,我的这个细胞像吗?
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发表于 2011-5-31 10:00 |只看该作者
间充干鉴定主要CD73,90,44,105,29. 阴性可以做CD34,45,11b,31
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发表于 2011-5-31 11:41 |只看该作者
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