求推荐神经干细胞培养基或者因子

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求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现絮状物质，拿枪头吹也吹不散，三天后培养基中会出现絮状物质，絮状物之中有大量神经干细胞球，目前想换一种培养基对照一下，酶解的酶目前是用的TryplE

深海寂寞鱼

1125476931 发表于 2017-1-16 14:47
2 `) J" m, k5 `' w# U* N  f求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现 ...

2 {2 l# m: F. F7 i3 A. p4 a: R请问你使用胰酶进行细胞消化的吗？2 b$ u6 d( W2 t* R& K' L, A

2 p# z. j  L; K% O8 ^* i( E就你描述的情况来看，感觉像是消化的稍微有些过，导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个：
* n: A- l* c% Y! d! z* |! F1. 如果科研经费不成经费，建议考虑换成Accutase进行细胞消化。) s3 m6 k& H" v

4 R0 m8 `4 [/ \! I7 a/ P2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶（具体浓度我忘记了，你可以查一下资料），这样可以消除絮状物l了。
9 H. u. P2 T  @6 T. M7 a) r1 ?+ ?    还有如果是用胰酶消化的话，消化时间不宜太长，消化后吹打不要力量太大。
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此外，神经干细胞不是非要通过酶消化法传代，机械吹打也可以用来进行传代，只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要，来选择传代方式。  C: Z  l- r/ k/ o" @, o) j

* Y- P0 f' b$ j0 h有问题多多交流。

wm阿咪

回复 深海寂寞鱼 的帖子8 t  k+ l( U5 c7 ~$ ~/ h
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我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度，每次消化后单个细胞总是长不大了，然后就分化了。

wm阿咪

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用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。