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求助:羊水原代培养(附图)   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-11-8 10:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-11-8 11:09 编辑
8 H# b! C' l/ L! @& C
9 Y9 r4 o$ ]0 i" p7 _! w4 }7 N) E妊娠中期羊水原代培养,目的,分离鉴定得到羊水间充质干细胞。培养8天后,细胞培养皿中出现如下细胞,请教下,这些是我要的间充质干细胞吗?顺便推荐些需要鉴定的细胞表面抗原,打算用流式鉴定。谢谢
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沙发
发表于 2010-11-8 11:14 |只看该作者
哥们 羊水干细胞不是个好东西  趁早 洗洗睡吧

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藤椅
发表于 2010-11-9 08:22 |只看该作者
自己顶一下,看了别人的羊水干细胞图片,跟我的差好多啊,不知道我养的到底是什么,请高手指点,谢谢

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板凳
发表于 2010-11-10 09:20 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
自己再顶一下,看了别人的羊水干细胞图片,跟我的差好多啊,不知道我养的到底是什么,请高手指点,谢谢
8 D: n* y/ F+ P1 d6 t" r& ^本文来自干细胞之家  - 中国干细胞研究员的交流论坛http://www.stemcell8.cn,详情请看:http://www.stemcell8.cn/thread-29692-1-1.html

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报纸
发表于 2010-11-10 15:00 |只看该作者
首先,从图上没有办法定论是什么细胞,也没有见集落形成,所以可以怀疑不是干细胞;$ ]4 a3 }$ k/ G% U$ D# F% c' t7 C! u0 n
其次,间充质干细胞的鉴定也不能用一种方法就可以下结论的;* \1 @5 q5 l- C4 Z" M, Z
     建议把细胞传代一下,最好能把密度提高(可以合瓶,也可以放到小的培养器皿中,也可以把培养瓶倾斜培养等等),密度太低细胞的生长周期太长,容易变化。. b3 w" I' g5 P5 |6 i4 z# F

  s" I( t7 j) ^& s顺便说一下间充质的鉴定" d9 f4 Z; o4 ~% U* |

. R* T- v; F; c一、从形态上看,长梭形,漩涡状生长;6 [. T- l8 K7 m+ a; M# [! z7 N# |
二、表型上CD44、CD29、CD166、CD90、CD73阳性,如果不全测建议可以测CD44、CD29;/ c; H5 t7 _/ v4 N" i
三、免疫组化或免疫荧光测波形蛋白,波形蛋白阳性,测CK19,CK19阴性
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地板
发表于 2010-11-11 08:56 |只看该作者
学习了,谢谢!

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发表于 2010-11-18 13:56 |只看该作者
羊水来源的细胞贴壁的有三种:上皮样,成纤维样,还有就是羊水特异细胞,你的细胞形态多样是肯定的,如果纯化,就要免疫磁珠法最好
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发表于 2011-5-31 09:04 |只看该作者
这是我羊水原代培养得到的细胞,已经传到20代。
8 `9 a( L* d! S用荧光定量PCR做了几个鉴定指标:) ?( r9 ]) @( T' W+ F& F+ }
       CD45,CD29,CD73,CD44,CD166,CD105,CD90,OCT-4 表达
2 A7 q" s$ `7 I$ R: x    CD34,CD14 未表达
% J+ d; J5 D7 O& D由于经费问题,没有做流失鉴定,三系分化鉴定也只打算做脂肪分化。
/ D1 l) h8 Y* L( P% r3 U
1 |7 n! e8 u' r% r' G各位培养过羊水间充质干细胞的前辈们,我的这个细胞像吗?
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发表于 2011-5-31 10:00 |只看该作者
间充干鉴定主要CD73,90,44,105,29. 阴性可以做CD34,45,11b,31
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发表于 2011-5-31 11:41 |只看该作者
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