ips中的疑惑（附图）

小刀

+ Z5 c+ J6 [2 E) J" D7 j8 _* S* l& H1 w: I8 V" Y
1.培养过程中见到很多网格状结构：不知道是什么原因，我猜想是不是细胞老化：) l: F# H1 C6 j
2.最近几日又见培养皿中出现如图状结构，我猜想是不是ips的克隆，但是ips的是圆的，而且周围有细胞环绕，但我的是不规则形状却没有，很像成片脱落的细胞。我想我肯定是想克隆想疯掉了！. h! n. G) X. a6 l" q
3.刮取了少许2中片状结构，转至24孔板中，第三天，细胞漂浮不见贴壁见图： 前辈指点，谢谢

jiejesse

你的很有可能是所谓的carcinoma stem cell，可能是你的操作过程中细胞癌变了

dwc326

第一幅图很像我们药物筛选的HeLa长期培养后的样子。
0 Y& ]: C8 t7 s3 W3 `  X首先你这个细胞是不是传代次数太多，细胞老化了？
1 [; d% Z* ~% }4 B第二传代后留下的细胞是不是太少了？因为如果传代后留下的细胞太少，缺少必要的细胞与细胞间联系，细胞生长缓慢，那一团团的东东貌似是单个细胞的克隆，等长满了，中间的已经挂了。刚学习养细胞时师姐告诉我的，仅供参考! C% f+ D8 \, s* K) I
是不是IPS还得坚定吧，不能光从形态上判定啊，丢在软琼脂里培养个个都是球，还都是单细胞克隆球呢

xyzengh

有时候细胞不完全重编程会出现图一的那种情况，你可以试试在这些细胞上再次感染病毒会不会有奇迹发生；如果不看边缘，我很喜欢你第二张图的“iPS细胞”，可惜...；第三长图看起来不像，但我告诉你，不是所有的ES/iPS细胞传代后都会贴壁，传代时加入Rock inhibitor会不会有改善，如果打得过散传代后几天内都看不到明显的克隆，耐心等几天看看。
% v3 C0 a' k0 J5 m% E( [3 S( j如果这些都不行，请你参考细胞海洋超版刚刚转的我写的protocol，两种病毒体系都是我亲身试过并成功地，重复性很高，如果你所有试剂和操作都没有问题的话，我等你的好消息！

Jonathan

回复 1# 小刀
: _0 T; R& r* b- h. T; t- i* l4 U: T
% }  p1 c& W/ w" J5 n第一个图片，转了4因子？感觉形态变化，好像c-myc加多了一样。第二个图片，一看就知道不是ips啦。长成那样，还要挑来干嘛。ips在低倍镜下可能跟你那个看起来有点像，但是高倍镜下，我敢说LZ的那些，肯定不会很紧凑。第三个图片就不知道了，没做过。没法评论。
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3 B9 ]; A, ^( l, @至于2楼说的是carcinoma stem cell，不敢苟同，单凭形态没法判断，那些也有可能是多倍体，多倍体也会长成那样。也有可能是一些基因的表达不平衡导致（此说法只是猜想，没有经过实验验证）。

lorey

学习了！

friendly0722

要是有放大的图片看看就好了，

细胞海洋

要是有放大的图片看看就好了，& h/ }" _) x( L% T
friendly0722 发表于 2010-5-10 18:29

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% B/ e( L* c8 g( M8 p
! h  {; u7 S6 Z  L1 `; A/ Y7 m    点击图片 可以看原图

精检人生

努力学习！感谢大家！

双刀

楼主的是感染了几天的细胞？是人的还是小鼠的？3张图都不像ips