PGC的培养 补充中

ellapan

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂. R" `0 G% w/ q$ O# y
% ]+ L7 R3 O/ A) G# G: q2 M/ M
如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
; |& z( z5 f5 p+ e  R* t1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture1 r3 H% Z( E6 R6 B# ?& {
1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP
, Y" k; `% g% k. a! k  z) e6 F2 j" h1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth+ p+ f9 u! r; g
1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System- Q1 \. c# ]) e( i8 x
1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro
; B! g) G# r( f1 n: [1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures
( ]# t6 a! \7 d$ P0 z( P1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata* ]; j6 `! d; x0 P
1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth( f6 g, m  w& H! f! E
2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development0 @' o9 Z7 a  A" r7 H
2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse" O5 o6 {* B) ^
2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
, N# B; X7 \8 u. Q) N2001 Twenty years of research on primordial germ cells2 Z$ U5 ]9 o; [4 G# K
2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro
. Z# ], \; N$ q: c2003 Primordial germ cells in the mouse
' l+ {/ @% w8 b  F$ ]- p2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz
( k( C4 D/ ~* {, L9 z/ i1 M# p6 j2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation1 l' F; e* m( o+ Y( Y
2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo
+ ?4 M; {7 }$ g- z" _6 b2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation% v/ M. l. A' M. n5 J6 k! o
2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival- q3 {& ~+ M1 b4 j' |' o
2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.
) C/ w( ^( X& k2 H9 x: t2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells* B" R5 X" Y; z9 P( s6 e3 X
3 ~3 R. a6 {1 x. R, [2 X7 b
上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看

jiejesse

很好

ppcl2

/ z( [& k( R' H5 X! J" Q* s: Y. B

+ y* N6 n, u: K* F国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！
) }0 a4 P+ `1 w4 e/ W7 B现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。

ellapan

回复 3# ppcl2 1 T9 p% X) H( b/ r
  t9 }9 ^% d$ s: m
   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导+ l( I8 F% ]+ x' m) o. M
  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人
. t- `8 J7 r6 Z- D. t9 C你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法

ppcl2

" d7 d8 ~6 x) l# F3 ^( W. L* ]3 ]5 h0 `" a5 e  C: p
哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。
, N% S- I5 t* n5 E$ k我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。8 \: y& X( K6 W8 `- f# B. h' K
能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。

ppcl2

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。

ellapan

回复 6# ppcl2
4 K! X% G; \5 O- U
* ?3 l3 c9 x4 }4 L6 Q
  j, ^8 M2 G( i* }7 `: `    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

ppcl2

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。

chenkang91

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？

细胞海洋

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4 T0 M; p9 A. r! v8 k9 @% P" m
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