PGC的培养 补充中

ellapan

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂
7 B% p, Z, K9 m. }' R% N, x2 p* i$ B
如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
2 o% ^3 S" n: ^8 N1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture
2 l$ a; C6 [' V( t' h1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP. l7 G$ Y' [% [- L9 Q
1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth; I! S! |  ~8 E) s- B+ s
1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System
1 A1 x1 Y1 c0 }8 _! I9 L1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro
# ~4 Q/ v; ?- j: g' {5 S1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures0 x1 _) C2 Z: r7 {0 ~+ L: c
1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata
$ G* |$ x0 X) }, c9 p$ S1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth
! T8 M4 I) C! T; s" ^2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development
6 c. ^1 x$ O) r5 K% D% B8 @2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse
. B" R( K9 g, S4 \2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
8 B) L+ B& V+ j& P, ?$ L2001 Twenty years of research on primordial germ cells1 g' [8 q7 }7 z2 E- j5 Q* F
2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro
' a4 u1 I+ _+ v* K  X2003 Primordial germ cells in the mouse" h9 t$ U9 v7 v4 w4 Q
2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz( n9 ~) M/ L. |( m( o
2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation
& A. t5 Y! `' m, m8 f2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo
5 F, S. T/ f* b0 z/ n" t2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation
' o& L# ?2 L6 l2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival
% y1 c/ G/ t6 g" Q( m$ ~0 ~2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.4 v0 [8 Z% m4 F$ @; Y/ p  E$ B( }
2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells
- w4 U: f/ Q7 Q0 y7 E" @8 v6 t" F& A
上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看

jiejesse

很好

ppcl2

; {8 _/ Q' ?2 t- T6 a1 @4 [

+ V/ N) l/ Z; r国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！1 u- }7 a7 I+ m3 \  S6 a
现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。

ellapan

回复 3# ppcl2 + D0 n$ C; e  z) P5 F; d& r
! _/ f0 d5 F& Q) {$ s, D  i! }, T
   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导8 s' L% U4 j& |8 m" T" ?- U
  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人" u3 N: q3 @1 k
你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法

ppcl2

1 _' a  i: g# @% M( |

, p+ z0 v* E6 k( h2 k5 y9 R$ Q哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。
: O9 p$ V; |/ Y& @9 t我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。
3 A8 v$ x2 J5 o! G9 h 能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。

ppcl2

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。

ellapan

回复 6# ppcl2 ; `% b% k) u1 {# y0 S

; j4 k4 R2 |  X! _! W7 g9 X2 B/ L  Y. o2 @
    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

ppcl2

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。

chenkang91

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？

细胞海洋

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