求助！玻片细胞贴壁问题！ - 神经干细胞专区干细胞之家



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Tim

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楼主

发表于 2012-10-23 11:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

本帖最后由 Tim 于 2012-10-23 11:48 编辑 $ l' d2 Q. p6 q; n4 s1 V
* O+ N5 h$ v J( C2 U0 P
我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

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沙发

发表于 2012-10-23 12:33 |只看该作者

本帖最后由 jhu132llh 于 2012-10-23 12:33 编辑

接种的问题* j: n; O1 o6 e' H- {
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞
因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

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quge_00

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藤椅

发表于 2012-10-23 13:05 |只看该作者

本帖最后由 quge_00 于 2012-10-23 13:06 编辑 & u% O7 m: J! }; C @

回复 Tim 的帖子; `3 m9 o4 b& {: f( A
5 _) r( k3 K% h4 Y- o( f
1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；
2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，' h A L, N4 ~* i* K3 U6 g
小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间4 W4 m$ K) P5 Y* P% `/ K
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

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Tim

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板凳

发表于 2012-10-29 17:39 |只看该作者

回复 quge_00 的帖子

方法极好！非常感谢！

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小渝

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报纸

发表于 2012-10-30 15:37 |只看该作者

回复 Tim 的帖子5 L. q+ r0 q( v, M

我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。