请教胚胎聚合方面的问题

461650833

最近做胚胎聚合，可是胚胎一直聚合不上 ，我们在做的过程中发现，在去掉透明度后，仍有一层薄膜，胚胎一直聚合不上，想请教下这是怎么回事？
* e6 |/ t! E5 `3 t2 I# W: E2 W) _

461650833

回复 zpzp0312 的帖子
- n# k( w/ U1 K2 y2 f/ @
9 R* x. u' S4 f( m0 u我们试试多处理一段时间 看看效果

zpzp0312

看来你那里的实验室配套设施应该挺齐全的; y' @9 [2 t% Q, Q, V) n5 Z* g. n
说的都对
5 I( L; H6 Q: s% Q- O目前似乎就是透明带处理有问题了，多处理一段时间，通常来说在镜下应该能看出来是否已经除去透明带。* `( P8 F- v, t7 O& L) B3 E9 \
如果看不好就收集那些似乎沾到培养皿底部的胚胎，轻轻一吹就下来了。这样的胚胎透明带绝对已经去掉了！

461650833

回复 zpzp0312 的帖子% V) |$ ]; H7 P8 S" v
, w* y4 D: _1 ]
做的是猪孤雌胚胎聚合，做了几次都没有聚合上。8 M2 ~! N% Q; f9 ^9 @) q* p( a6 C
你所说的小空间，可以是WOW培养系统吗？
/ ]* {4 C! i' |' k& i: _" B! L促进细胞粘连的试剂可以用什么，植物凝集素可以不？

461650833

回复 have-a-rest 的帖子
) K7 X2 i% B8 W6 X+ C2 U0 B, R' I4 V3 P; l6 W; C( `7 @
猪孤雌胚胎啊 用的是pronase

zpzp0312

通常来说，透明带是可以去掉的) R7 @/ X% d6 o  r9 D1 ?
如果遇到楼主这个情况应该是在去透明带时没有观察仔细9 ]7 m! b. e4 \8 w9 e, z
你可以把那些看似还有一层薄膜的胚胎处理时间延长一些，“过处理”一下，让若干容易去除透明带的胚胎多处理一段时间，到时候可以淘汰不用。剩下的胚胎透明带应该大部分都去除了。1 [1 h3 M2 W- W( G# h
另外聚合过程中一定要在一个小的空间里进行
' t* [) D' {; e) j; z# e0 Z, Z7 m如果没有合适的工具, v9 o7 Y  J' H: x6 J& m
也可以考虑使用一些促进细胞粘连的试剂: q8 k' K+ d+ V0 B
楼主做的是ES聚合还是胚胎聚合（二倍体/四倍体）？; Q! [! ?1 k3 H
用的ES细胞和胚胎的品系都是什么啊？

have-a-rest

什么胚胎啊，透明带怎么去掉的？