细胞传代培养法

liqinzhan

9 q7 D  n8 }& O  S" ?1、吸除培养瓶内旧培养液
. g& [% D2 F: C/ f! \2、向瓶内加入0.25%胰蛋白酶，覆满瓶底为限
/ S& q* a( [6 F1 N9 l0 [; x5 S7 O3、置温箱中2--4分钟，（或在室温中把培养瓶放在倒置显微镜下观察）当发现细胞胞质回缩变圆，细胞间隙增大后，立即终止消化（加入胎牛血清）6 G. \6 j3 U  Y' m8 o7 X  ?, u* i
4、吸除消化液，向瓶内注入PBS或NS2ml左右，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉，注意加PBS或NS冲洗细胞时动作要轻柔，以免把已松动的细胞冲流失掉( R1 O: l& c( Z  p+ L
5、用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使细胞从瓶壁脱落，形成细胞悬液，吹打勿用力过猛，以免伤害细胞/ D" |( U4 l; X' }/ y( K1 I
6、把细胞悬液分成等份分装数个培养瓶中，置温箱中培养。