- 积分
- 168
- 威望
- 168
- 包包
- 601
|
回复 pla269 的帖子
; w6 F/ q! X( W3 w3 y* b$ n2 O( ~
4 i8 F! w" p; O# H. e. z( u我们正常的流程是:
- O$ Y; z- U6 r第一天,下班之前也就是5点钟接菌,37度震荡培养;( K& A% H7 Z! _8 H1 t; F% ^* v1 P
第二天,上班的时候(9点钟)收菌,培养的时间也就是16小时左右。4 D0 n ?, d' g2 }7 E7 Z
基本上是目测判断菌量的多少,很久没有测定过菌液的OD值,我忘了是0.6-0.8还是多少,你可以自己查一查分子克隆手册。凭着经验,看起来比较浑浊就差不多了,因为我提取质粒一般是用作细胞转染,按照我们以往的实验,都是大致这样的流程,所以没有很细致的去研究这个。: S- h( i; o/ m1 r
摇菌4-5小时的话,在我们这边不大合适,因为这样接下来还得抽提质粒和验证质粒需要花费2-3小时,那样一个工作日就排满了,有可能做不完还得加班。3 ^/ u) X% d$ j/ \
我觉得在基础实验这一块,尤其是商品化试剂盒非常成熟的基本实验技术,第一次第二次认真参考实验手册,这样你就会得到自己的判断,如果只是简单的得到质粒作为后续研究使用,你大可不必拘泥于实验手册,毕竟每种菌、每种质粒有自己的特性,怎么方便实验流程怎么来。 |
-
总评分: 威望 + 20
包包 + 30
查看全部评分
|