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[请教] 质粒提取不纯 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-23 22:58 |显示全部帖子
40ng/ul,这个质粒的OD值很低。建议你直接菌种划线,最好挑几个单克隆做下PCR检测,接阳性单克隆于试管在摇床培养。最好分析一下该质粒的基因序列,如果是你自己构建的克隆,你要弄明白它的功能区里面是否插入致死因子编码区,或者有其他增强型的表达蛋白,有可能会决定你的质粒拷贝数很低。至于有一个4K条带,那可能是断裂的DNA片段,你可以做一下PEG纯化,若效果不明显,只能做胶回收。
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