2014年 Nature scientific reports上的一篇关于“重组蛋白诱导iPSCs”的读后感

Andyhigh

xray19 发表于 2014-4-6 11:56
- m" @2 c" d. G& I3 Z) Q6 N+ R9 ^不好意思，昨天没上传上去

# w+ z6 ]; z0 W! N/ n9 Z7 w# o
您是本文作者嘛，很希望您能对本篇文章进行总结和评价！
& J. E. O, }; E) _6 g( o0 f8 F我刚大致看了下，这里与大家分享下我的看法，希望能起到抛砖引玉的作用。
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6 b# g3 }. T5 E' [; Q! l% B  A1. 刚打开文献，查了下杂志的IF，并以为是一篇用4因子（OSNL）诱导鸡体细胞重编程的文章，但看过摘要后发现自己错了，这是一篇”利用重组蛋白探索鸡ESCs 培养体系“的文章，文章具有较好的创新性，给了我一些启发，如在 用蛋白介导体细胞重编程后，是否可以利用重组蛋白 一直维持干细胞的多能性，甚至创建一种新物种ESCs的培养体系，值得尝试。* B/ {8 i/ A+ `* u/ s

8 y" M0 _! r5 u( I2. 文章的思路: A. 用EGFP验证9R的功能； B. 国建pCMV-PF-9R-IRES-EGFP载体，瞬时转染293FT细胞，提取蛋白并浓缩； C. 加到鸡ESCs培养体系中，观察传代次数（一系列的检测指标），发现重组蛋白能抑制鸡ESCs的分化，能在体外维持ESCs的多能性( }6 q3 V: D! R+ ^

/ U$ @1 w  l9 c) t6 D3. 有一些疑问:  目前哪些物种获得了可以再体外长期传代的ESCs，求高手指教！！！另外文章中超声破碎细胞时的溶液是什么，还有转染效率怎么样（出现绿色的时间和比例，质粒应该没有线性化吧）这点自己比较感兴趣，希望Xray19能告知- u" Q# Y/ N( x+ h8 q& i

+ p7 M* j9 L/ R2 s' W( W4. 文章整体比较简单，不过也是一个完整的Story，自己推测应该是一名研究生做的工作。顶一个
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Andyhigh

回复 xray19 的帖子0 q, Y. _! c6 V; t+ ]+ {. h

- c/ p: K# |* d1 J大鼠的ESCs及培养体系有，猪ESCs也有，但是缺乏培养体系，其他的不太确定，估计绝大部分都没有公认的培养体系。