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[请教] 吸取单个核细胞时(也就是吸取灰白色细胞层)的问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-8-8 13:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
    书上说吸取灰白色细胞层时,沿管壁吸取,但是实际操作时发现,在管壁的边缘有一圈细胞絮状物,有颜色,如果吸取的话,离心后,细胞中混有的血小板和红细胞很多,如果不吸的话,离心后的细胞数量少,但是够白,怎么办?大家都是怎么处理的
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沙发
发表于 2012-8-8 14:49 |只看该作者
我们是吸取了的,虽然混有血小板和红细胞,但不影响种植贴壁
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藤椅
发表于 2012-8-8 14:53 |只看该作者
我的做法是从白膜层的中间吸,如同将树连根拔起一样,将膜整个吸起来。我们认为混有少量的红细胞关系不大,通过换液自然就去除掉了。
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板凳
发表于 2012-8-8 15:42 |只看该作者
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回复 zhujiang007 的帖子
9 s: z2 Y* H, C* C  u/ H6 w# J6 h
恩啊 ,那样看似不错,但是当你用吸管吸到量程极限时,你会停止吸液,这个时候会造成一个冲击对液面,如何处理啊?
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报纸
发表于 2012-8-8 16:14 |只看该作者
回复 突击兵之小土豆 的帖子
# H1 Q9 b" r" [; H: N$ R
; h6 p$ Y6 n2 e8 P' C我使用25ml的移液管在50ml离心管中吸,貌似不存在你说的情况。
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地板
发表于 2012-8-9 09:05 |只看该作者
回复 zhujiang007 的帖子
+ h2 E( {7 I- w- N; [! D& u5 u  B. \4 C! m/ N+ \
    强悍,我们用10毫升吸管吸,所以有那个问题
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发表于 2012-8-10 16:07 |只看该作者
我们用3ml一次性吸管,慢慢吸多吸几次就可以了
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发表于 2012-8-10 21:17 |只看该作者
红细胞及血小板随着换液后就会除去,如果是贴壁的要用PBS液冲洗,那样可以去除悬浮细胞。
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发表于 2012-8-11 06:07 |只看该作者
可以重新加入淋巴细胞分离液上再次离心一次
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发表于 2012-8-13 09:40 |只看该作者
回复 wcforever126 的帖子
$ ]& ~6 K5 R( [' \# d) k, l1 @
) V; c" r: ~6 E* o6 [+ L    你的回答和我差不多一样,但是在操作上,你的速度控制如何呢,尤其是角度,要不不容易观察。
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