分离单核细胞时，如何吸取白膜层？ - 淋巴细胞生成专区干细胞之家

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楼主: lxy07	go 分离单核细胞时，如何吸取白膜层？ [复制链接]

孙帅帅

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21楼

发表于 2015-4-7 09:07 |只看该作者

离心后管内分为三层，上层为血浆和Hank's液，下层主要为红细胞和粒细胞。中层为淋巴细胞分离液，在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带，即单个核细胞（包括淋巴细胞和单核细胞和低比例的干细胞，此外还含有血小板）

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孙帅帅

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金话筒帅哥研究员小小研究员优秀会员

22楼

发表于 2015-4-7 09:09 |只看该作者

分离人外周血单个核细胞，理论上1ml血能够得到1-2×106个单个核细胞，每次分离都可以得到106个/ml细胞。另外，分离时一定要注意血液稀释是等体积稀释，稀释后血液与分离液的比例是2：1，书上说是10ml稀释血用3－5ml分离液，但通过我的经验是2：1分离效果比较好；再有就是离心速度和时间，一定是20℃ 2000rpm，20min。