手采集外周血培养CIK疑问！！！

lyj-0017

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' L  g: e; f* {8 Q! p9 o0 N
$ R# e- @* p  n/ x采集的外周血离心后，分离出血浆，剩下的不就只有细胞团了吗？再怎么按照1:1加PBS稀释？

lyj-0017

回复 a276038921 的帖子; ?' y" h( {6 G! d  Z7 g. h6 d8 V: F

+ K$ G9 B# l% C/ D5 a2 o混合的时候，有没有可能加入的DC细胞太多，部分DC细胞因接收不到生长信号而凋亡？

lyj-0017

回复 levell 的帖子; K0 I7 t- `. S) E5 F! x5 F# `

0 G7 q0 P; G: C# T首次铺瓶贴壁时，加入培养瓶中PBMC的密度一般控制在什么范围之内？分离出来的悬浮细胞再次装瓶的密度范围是多少？

aochongyu

以前比较过先离心外周血再加盐水稀释和直接加盐水稀释，感觉先分离血浆得到的单个核更多一些，并且省分离液

lyj-0017

回复 aochongyu 的帖子. [- C' f& e1 H1 p3 A  `' d
4 J7 D5 U5 G4 R* H
我个人也感觉先离心外周血再加盐水稀释会更好一些，无奈领导执意认为后者好~

levell

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, Z) H! P1 @  s0 r3 `4 X7 `
6 A" n( r& l6 W$ x剩下的细胞也是有体积的啊，按体积加入PBS就好啦

levell

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4 J# a6 _7 T* [
  V$ I3 l4 y* I; q& y) D3 N& |首次贴壁时候将单核细胞调整为2×106/ml，2h贴壁后移出悬浮细胞，调整浓度为1-2×106/ml，以经验来说就直接移出密度就合适着呢，不用再处理，直接加因子就好

xyz2120091064

个人认为先离心富集红细胞再稀释，这样不仅红细胞多而且有自体血浆

lyj-0017

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5 D0 i, O' f7 d7 ^3 R4 |8 F/ Q2 m; e  r' h) \
OK，非常感谢！

lyj-0017

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8 ~' a1 a+ |- X2 B! p+ v) ?9 J% Y+ o8 A2 M& Z& ^
自体血浆不是已经离心去除掉了吗？