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[请教] 荧光标记哪家强 [复制链接]

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包包
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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2014-12-2 11:21 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
因为实验需要用到流式分选活细胞,但我现在手头只有没有标记的一抗,所以想请教下:$ x9 m* E& {$ Z, M
1. 对活细胞可以采用一抗加二抗的方法标记吗?整个流程大概要多久?! [- K: g! ?: L0 r
2. 如果上述不行的话,我是重新购买荧光标记的一抗好呢?还是找公司在我现有的一抗(多抗)上标记?那家公司提供优质的服务?
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沙发
发表于 2014-12-2 13:48 |只看该作者
1.可以采用一抗加二抗的方法标记;整个流程要3-6小时吧;
1 B) P6 ~# o- A! ~% @0 u5 ]2.如果资金允许最好还是直标的好用,方便!!!
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藤椅
发表于 2014-12-2 13:48 |只看该作者
本帖最后由 bio-bin 于 2014-12-2 13:51 编辑
/ W3 ~$ {0 I+ O2 E% ]8 |5 u2 d+ f  k; J5 `9 v1 E9 H9 p
当然时间上还是有很大夸度的,我们这边分选下来一般一个早上就没了!
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板凳
发表于 2014-12-2 15:15 |只看该作者
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我推荐用BD公司的,我现在用的,CD34,还有干细胞转录因子试剂盒用的都是BD公司的
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报纸
发表于 2014-12-2 20:56 |只看该作者
一抗加二抗的方法标记当然没有问题。
) H. S) q5 h$ ~. pBD的东西还是比较好用的
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地板
发表于 2014-12-3 18:04 |只看该作者
回复 bio-bin 的帖子
9 [: @6 J: w$ x5 A% p, @0 \$ C1 _. b3 B7 O! s$ ], F! [# ^7 w5 e& `
谢谢!就是说每次都要处理3h以上,那么对RNA表达有影响吗?
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发表于 2014-12-3 18:04 |只看该作者
回复 zuming 的帖子& a* U! j$ e) T* P7 _: O

0 ~0 r) p3 L3 z3 g  h嗯,谢谢!

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发表于 2014-12-3 18:27 |只看该作者
回复 w343989328 的帖子. K4 P3 `2 I9 X7 H

& A& ^0 D( C' `; T对RNA有没影响而且是哪方面的影响(有利或有害)我也不清楚,只是老板也说过抗体与细胞抗原结合和整个实验过程的耗时等对细胞多少还是有影响的,但对我们实验产生的影响可能相对会弱,设好实验对照把差异降低就好!至于对你们实验上的影响有多大不是很清楚,具体实验具体分析。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-12-4 11:49 |只看该作者
如果你是做细胞信号通路,我觉得cell signalling也是一个不错的选择。
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