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楼主: 20084720113
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细胞冻存之后计数结果细胞数变少了,怎么回事?   [复制链接]

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发表于 2014-12-30 15:50 |只看该作者
冻存复苏的过程中细胞会有一部分的凋亡形成细胞碎片,细胞数目减少很正常,
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发表于 2015-3-4 09:41 |只看该作者
不知道你的操作过程是怎样的,一般来说冻存前计数两次以上取平均值,并且是在离心后计数,以保证计数的误差较低;
! ]! o$ D( `" P8 p  D复苏时可以在离心前和离心后分别取样计数对比死活细胞比率,可能能看出是否由于冻存方法造成细胞死亡还是计数问题。
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发表于 2015-3-8 16:14 |只看该作者
我们也有时出现这种情况,个人觉得冻存操作有很大关系。比如,冻存前吹打成细胞悬液时不要有气泡,否则会很影响活率。第二,冻存液提前配置放在4度,因为常温下的DMSO对细胞毒性大。第三,复苏时要快速复温,最短时间内离心去掉DMSO,同样的道理复温后DMSO对细胞毒性大。
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