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楼主: Zhouhaiyan12388
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干细胞培养是不是要特殊培养基   [复制链接]

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发表于 2015-12-1 08:53 |只看该作者
维持的话,早期用feeder养时,用的KSR加bFGF;现在有更便捷的培养基,E8和mTSR1,后者更贵,一瓶500毫升2000多。B27和N2一般在进行分化protocol时才用。
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发表于 2016-1-13 23:17 |只看该作者
本帖最后由 liqiang8589 于 2016-1-13 23:18 编辑
  H4 v( b4 W, y! V; o9 r, K' J- E( H4 A+ L% S; ~( H1 i' F
2% --- FBS  _0 q3 z% a$ v( R: t; d% D4 r
5 ng/mL --- rh FGF basic
$ d9 L+ g  K& k+ A5 ng/mL --- rh FGF acidic: o3 S3 H* i2 Y# `! r
5 ng/mL --- rh EGF
9 m/ p$ H; Z2 X2.4 mM --- L-Alanyl-L-Glutamine$ g( C* e* ^  Z, e5 [
---------------------------------------------
9 g9 A  f8 c1 Z+双抗
2 I" Q2 l9 T- |3 a+ D4 i这个是在ATCC网站上找到的---低血清人间充质干细胞培养液' i7 n; m6 Y, K% ^
现在论文好像都都在用DMEM-low glucose培养液为基本培养液, w/ p- c4 V4 ^2 [; h  y1 m: M
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发表于 2016-1-19 14:58 |只看该作者
干细胞培养一般是DMEM等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如kGF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
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发表于 2016-5-12 15:22 |只看该作者
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可以参考文献或者专利,有的干细胞比较好养,基础培养基DMEM/F12加血清就好了,但是血清中的一些成分会导致细胞衰老或者分化,如果传的代数不多,基础培养基就可以满足培养要求。如果传代数多,或者对细胞质量或者数量要求比较高,就可以用专用干细胞培养基,那些培养基会要求加少量血清或者不加血清,对细胞分化影响比较小
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发表于 2016-8-26 19:21 |只看该作者
哇!感觉这个帮助很大!但还是没有弄明白是加血清还是不加 ?

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发表于 2016-11-17 14:27 |只看该作者
我们实验室用的是6 Y* u7 P5 o+ `' ]
15%ksr: l* l' E2 l; N& x; K
高糖DMEN
* ?3 C# j3 ^( x+ G7 a* t  S1%NEAA
0 J& a5 y6 J* ?1 m: X1%Pruvate
, p9 n. e, S3 ?4 z1%Glutamine
$ h  z+ x, N1 a" D& t" F1%双抗( l. ~: O: a7 r( D! m0 W1 w% t
1%FBS, m0 V: m4 d4 H; E* ^; l& O
0.1%LIF外加beta巯基乙醇
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发表于 2017-3-8 10:18 |只看该作者
这要看你要保持干细胞的全能性还是要分化成其它细胞了。
; z/ S. ^( U& a( ^% N* [7 p如果是iPS的话,如果是要保持全能性,好像普通高糖的DMEM就行,不过就是要每天换液。我们实验室用的是ajinomoto的ak02,可以保持很好的全能性。
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发表于 2017-4-24 08:55 |只看该作者
干细胞培养基一般加了一些特定的细胞因子,避免分化;一般多用无血清培养基,而且不同类型的干细胞所需培养基的类型也不相同
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