干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

干细胞技术讨论区

干细胞文献资源库

干细胞临床应用技术交流

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

查看: 14648|回复: 0
go

大鼠急性心肌梗死模型的建立和心肌内移植手术步骤:  

Rank: 3Rank: 3

积分
493 
威望
493  
包包
973  

金话筒 优秀会员 小小研究员 热心会员

发表于 2014-4-11 11:03 |显示全部帖子
(1)给予大鼠0.3ml/100g的10%水合氯醛腹腔注射麻醉。剪去胸前区和部毛发。用碘伏消毒两遍。; t) e- M0 B2 Z4 [* M8 h
(2)在相当于颈6水平横形切口剪开颈部皮肤,分离皮下组织及肌肉,露气管。用22号套管针行气管穿刺,进入气管后,拔除针芯,连接动物定压呼吸机。行间歇正压通气,频率为50~60次/分,调节压力见到胸廓起伏为准。8 C6 S2 O! |. ~% U- v& o" T
(3)沿胸骨左缘3、4肋间逐层剪开皮肤和皮下筋膜,撑开肌肉,断第肋,打开胸腔,剪开心包,露出心脏,用4号小圆针及0/5丝线在左耳下缘约5mm处结扎冠状动脉前降支。3 C/ I( x6 q; k1 B+ r/ u, e/ c
(4)观察20min后,左心室前壁颜色变苍白,收缩力减弱,认为心梗模建立成功。在心梗结扎的下方左心室的心梗区边缘区分5点,用微注射器在心肌浅层注射2×106个已标记的BMSCs(50ul/点)
9 p8 u, I  I! d; Q' n8 {4 O+ n; A' f  c4 B(5)观察没有出血后,关闭胸腔,在切口上撒青霉素粉预防感染,再关肌肉及皮肤。逐层关闭颈前区切口。待呼吸平稳后,拔出气管插管给予低流量吸氧2小时。术后连续3天腹腔注射青霉素8万U/只。7 m/ c! N" I) t$ m' I" X
2. 移植细胞的观察
) R$ w7 u9 k3 k7 V分别在细胞移植后1周、2周、3周和4周,每次取2只大鼠心脏,冰冻片,在荧光显微镜下观察移植细胞。
) O9 J% ~5 ~! J" n" x; I(l)大鼠0.3ml/100g的10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,剪开胸腔,取出心用冰冻生理盐水洗净。3 t% ~: y+ ^2 Y$ r( d5 ]
(2)将心脏用胶水包埋后,放入冰冻切片机冷冻,约15min后,进行切切片厚约为8μm。, v  V4 ^) F8 {; h, F+ g2 G
(3)将切片放在一20℃的丙酮中固定15min,再用PBS洗3次,5 min/次,避光保存于一20℃冰箱中。, r- ]9 V+ m( j. }: k
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 极好资料

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2022-5-18 20:15

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.