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楼主: a352167963
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你认为组织块贴壁法和酶消化法培养脐带间充质干细胞哪个方法更好?   [复制链接]

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发表于 2014-9-13 15:14 |只看该作者
组织块培养法是一种简便易行、成功率较高的原代培养方法,利用组织块培养法可以将其中一部分迁移能力强的细胞分离出来。
8 J* o5 u3 t4 l相对于组织块培养法而言,酶消化法步骤繁琐,分离成本高,但其能快速分离得到较多的单个细胞,通过短期培养就能得到大量原代细胞。
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发表于 2014-9-19 13:26 |只看该作者
回复 星空雾雨 的帖子6 E7 H2 u9 L* c/ s
" ~( i5 W8 h% t# p
可以,只要静脉和动脉去干净
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发表于 2014-9-23 14:37 |只看该作者
组织块培养周期太长,而且无血清培养基成本是含血清培养基的两倍,而且组织块培养的细胞分布不均匀,我已经用酶消法淘汰了组织块法,周期只有之前的一半
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发表于 2014-12-1 15:49 |只看该作者
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组织块法,较简便,但是也有缺点,就是获得细胞需要等10天左右,如果组织块20天以上才有细胞爬出,细胞会老化,变长、扁平没有立体感、细胞内有空泡。而酶消化法就可在较短时间获得细胞。
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发表于 2014-12-4 13:49 |只看该作者
组织块贴壁方法简单,但是需要较长的时间才能有细胞爬出,一般需要20天左右可以长满皿底。组织块贴壁法细胞得率高于酶消化法。而且细胞质量贴壁法会更高些
* l" B3 g3 a) s" T3 p: Z, m+ l0 o酶消化法消化时间不确定,对细胞伤害较大,但是消化后体积大大减小,细胞密度得到提高,原代细胞生长速度快,长满大概1周左右的时间。
* d' V8 X; u; J1 T两者各有各的优势和缺点。
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发表于 2015-3-30 16:08 |只看该作者
组织块贴壁方法简单,但是需要较长的时间才能有细胞爬出,一般需要10天左右可以取代组织块,更换培养基。组织块贴壁法细胞得率高于酶消化法。酶消化法时间不好掌握,细胞得率不稳定。
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发表于 2015-4-21 18:43 |只看该作者
个人两种方法都做,组织块法现在已经不用了,酶消速度快,后期就是换液传代,细胞分布均匀,10ml组织块14天就能收到2500万的细胞,而组织块两周才刚刚好传代,只是酶消前期工作量大些,技术要求高些
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发表于 2015-4-29 21:34 |只看该作者
我是喜欢酶解法,省时省力,而且5天就能长出很均匀的细胞,半个月能长3代,不会像贴壁法那样出现爬不出来的现象
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发表于 2015-6-4 14:14 |只看该作者
如果能确保内层贴壁,不剥皮应该没什么影响。可以尝试少放培养液,换液频率增加。
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发表于 2015-7-1 16:57 |只看该作者
1、组织块贴壁法相对简单,时间相对长一些,在15天左右就可以看到很明显也比较多的细胞,至于什么时候传代,要看自己的情况不要超过20天以后,那样细胞就有部分老化了、对后期培养不是很好。
8 g3 J; P) l- W! K$ s8 O% W2、酶消化法的话,还是要看使用什么酶,消化时间也要看使用的酶种类,不易时间过长,对细胞影响比较大,有时甚至会没有细胞爬出来,这方面没怎么做过,我有个同学做过一次,就没有爬出来# ?/ f/ M' H' E; u3 z0 h: S
至于说不去除羊膜和血管直接培养,个人不是太赞同,虽然都会爬出细胞,但是不同组织爬出细胞种类是不一样的,在加上使用的培养基又大部分是基础培养基,没有针对性,所以细胞纯度很难保证,对后面无论是研究还是临床都有很大的不确定性
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