包被方法诱导NK细胞的可能性！！！

大海之家

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) n- w! B( W7 B( l
请问你们NK细胞培养是使用NK细胞培养基还是淋巴细胞培养基的？是包被诱导还是悬浮诱导？

ccst4838318

回复 zhenhuale 的帖子3 l& n& l# w) h( t
9 C( o, R/ Q2 D0 l
50ml血扩增20亿个细胞单细胞量确实不怎么多，但是你的纯度可真是高啊，是CD3-/CD16+/CD56+细胞达90%，还是只是CD3-/CD56+细胞达到90%呢？想问下你这个这么高的纯度是怎么做到的？还有就是你的细胞因子是不是用的有点多呢，我们只用三种细胞因子细胞量就能达到60个细胞，但是纯度相对很低，CD3-/CD16+/CD56+只有30%，培养瓶没有包被。
4 x/ C+ L  {1 C$ T, R, |+ O再问下，你用的是什么NK细胞专用培养基？
" f. t  R: R4 L' k

ccst4838318

回复 zhenhuale 的帖子7 z& s0 T4 H  i7 i. W2 r
* g6 @, c4 ?0 D+ G, z5 u! ]# c7 F
50ml细胞量扩增20亿个细胞，就细胞量上来说不是太多，但是90%的纯度确实很高，你是怎么做到的，免疫磁珠分选了吗？我用50ml血可以扩增细胞量达到60亿个左右，但是纯度很低，CD3-/CD16+/CD56+细胞只有30%，对于你的90%我很好奇？还有就是你说你用的专门的NK细胞培养基，请问是什么培养基?

ccst4838318

回复 weijunning 的帖子
# w' x, l) }, P4 |3 g/ X* t
2 @) U4 j- @4 ]5 p2 F+ `什么培养基，有没有跟其他的淋巴细胞培养基做下对比，到底有多大的提升空间？我们做的没有进行培养基包被，因为是做临床治疗的，为了安全起见，虽然细胞量还可以，但是纯度较低，因此我非常想知道包被之后的NK细胞量和纯度上，在同样的培养体系下，和未包被的到底有多大的差别？所以想问问你，能不能给个具体的数据支持呢？

gondobar

包被的方法挺实用的，可以选择包被，血清用自体的，一般1%，看细胞状态适量调整。培养基干细胞的就行。

yanglixia1984

回复 weijunning 的帖子  h0 R, h8 m1 [. J" P- @

! s8 j  o0 o- e. o把因子直接包被到培养瓶上吗，如何包被呢

yanglixia1984

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) Y$ K5 c. z  J
+ B1 n: n8 \  b3 Q: N% D文献上有将这些因子通过转基因的方法表达与滋养细胞表面，然后与单个核共培养

yanglixia1984

回复 zhenhuale 的帖子
+ }8 ]# R" S) w$ O# ]; y3 \, ]( C! Z& l2 z+ E
你好能分享一下NK 的培养流程吗

yanglixia1984

回复 weijunning 的帖子$ \! |0 u/ G1 D0 T0 v4 z+ {4 L4 ?

, i: P8 O4 F" `" z" o普通的培养基就可以了

sonsyoran

今天看到一个专利上写用CD3和CD52包被，再用IL2刺激。仅供参考