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楼主: 微笑流滢	go [讨论] 亲们，我这个Western 的目的条带为什么出现了两条带？ [复制链接]

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21楼

发表于 2013-9-28 21:01 |只看该作者

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右边是空白对照的话，那下面的那条带就是non-specific 条带，上面那条带就是目的蛋白条带。

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22楼

发表于 2013-10-2 23:51 |只看该作者

呵呵，条带的距离和分子量虽然有关系但并不是线性的，和修饰什么的都有关系的，加个TAG就很可能跑出来这种情况的，如果你实在不放心可以再加一个不加TAG的过量表达的对照就清楚了。

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23楼

发表于 2013-11-13 16:44 |只看该作者

回复 moonison 的帖子! s& J8 f1 k+ { b# F% ^
- m+ q2 @( A& x1 p( G
额，我这个没有Tag

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24楼

发表于 2014-2-24 16:17 |只看该作者

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2条带，你是用的多抗还是单抗呢？抗体特异性会造成多条带，而且看你的图曝光时间过久，而且抗体浓度用的太高了，建议先测一测抗体效价，减少曝光时间，以及摸索下合适的抗体浓度

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25楼

发表于 2014-4-2 11:43 |只看该作者

这上面那条是由于东西多了上下两条带目测比例大概是 100：1 下面那条带我到时觉得和对照还是有一点细微差异的多跑跑看看有没有区别

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26楼

发表于 2014-4-2 11:43 |只看该作者

这上面那条是由于东西多了上下两条带目测比例大概是 100：1 下面那条带我到时觉得和对照还是有一点细微差异的多跑跑看看有没有区别

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碧螺春的秋天

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积极份子美女研究员小小研究员

27楼

发表于 2014-5-2 10:37 |只看该作者

非特异性，转入蛋白所带标签，翻译后修饰都有可能，不过看上去对照和实验的下侧条带一样，上面的过表达蛋白较大，有可能是过表达载体上有其他东西表达了，建议检查下载体元件

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