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楼主: 20111109
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细胞污染,急问!   [复制链接]

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发表于 2013-7-23 14:27 |只看该作者
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+ r* M2 n! D- u$ V9 b1 B$ `% L/ M8 E
$ q2 u0 ^- {% l4 F; r% `/ r我也是养原代,理解你!但是这黑点我也不好说是什么,可能污染的几率很大。不行的话换液等一天看看,实在不行只能扔了。

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2013-7-23 14:45 |只看该作者
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' a; C6 \: Z; y6 d4 q6 I  D
7 S; E9 z) x  q* z你的另外一批状态良好的细胞是跟你这批问题细胞同一瓶传过来的么?培养基是用的同一瓶么?那么培养瓶是不是也是一样的呢?如果只有这批细胞的话就多用含双抗的PBS洗几次,再传代试试看了,用新培养瓶和你那瓶好的培养基试试看,可以在培养基中加些双抗,要是还是那样的话就没办法了,重新提取细胞。
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发表于 2013-7-23 14:57 |只看该作者
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" x4 I9 l3 A2 C( T* Y/ `% J3 a" m. f% n+ L: o' d
根据你的描述很可能是污染了,所以培养细胞的时候一定要注意细节,一定在无菌条件下操作,这很重要,包括所有的操作和培养液成分都需要无菌环境!
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发表于 2013-7-23 15:33 |只看该作者
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回复 daiying5200000 的帖子
* G9 R3 c' h  w" W' l+ J7 ]
; t# O" u! {; r8 u  `6 C不是同一瓶细胞,培养基是相同的。我现在用PBS加双抗洗了2遍,加双抗继续培养着,4h后看看状态吧,不行的话,就重新传代到新的培养板上去。这样做应该可以吧?。。。

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发表于 2013-7-23 15:44 |只看该作者
本帖最后由 20111109 于 2013-7-23 15:49 编辑 : ]/ k0 v6 y3 j/ s& N
1 J1 ~1 g, i% |% f6 u$ h% r2 J$ m$ R
. ^0 K. _- ~' S- g7 G( b
决定还是把图贴上,这是经验教训啊。。。。0 I/ T# Q/ l! S  f' y/ @

2 h% U7 c0 U2 P! `$ n0 a: e" x, a2 ]  S
下面是换过液体以后高倍镜,细胞的状态还是很好的。
9 y" L  Z9 C1 V6 Z6 X7 F0 O9 G# ?/ p- j* m

% b% Q9 n) `1 @1 U6 E, `  _$ f2 {跪求这到底是什么污染。。。。
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发表于 2013-7-23 15:58 |只看该作者
看到图了才好发表观点

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2013-7-23 16:29 |只看该作者
似乎已经污染了,不是碎片也不是黑胶虫
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发表于 2013-7-23 16:37 |只看该作者
如果确定是污染,为了保证其他细胞的安全,还是把实验室熏30min臭氧,把培养箱也灭一下菌。还有就是你可以每隔五代冻存一批细胞,这样就不至于突然染菌还要从第一代开始养!
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发表于 2013-7-23 16:44 |只看该作者
回复 daiying5200000 的帖子) B* z7 N6 u- ?( `
: M, Q4 x$ x% b( z
那是什么呢。。。

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发表于 2013-7-23 16:44 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子/ r. W" c, ~: v! K8 t$ e
* Z8 h7 Q9 [# F. v6 G2 f
这个是第二代。。。。
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