脐带间充质原代活化后传P0

luyue6453

脐带间充质组织块很黏，要进行两次活化，请问都是怎么活化的，我活化后传P0发现长的不好，细胞出来的特别慢，特别少，需高人指点一下。传P0后要细胞长出来换液，还是隔几天就换一下，是全量换还是半量换？

流泪的鱼

隔3天半量换液，细胞生长快慢和培养基关系密切，有血清和无血清培养基培养的细胞快慢不一样。

luyue6453

我现在是每隔三天就换一次，可是我发现组织刚贴壁就被冲下来了，尽管我尽量避免。所以我想了不可以得到细胞长出来后我再进行第一次半量换液。

luyue6453

怎么没有高人指点一下这么做可不可以呢！

萝卜干4892

我是看到有细胞迁出后补液，再根据培养基颜色，细胞增殖情况进行换液。一般情况是3天换一次液。

luyue6453

我现在也是三天换一次，不管长没长都是按天数换的，所以细胞长的不多，真的好烦啊

zhangjieyctc

回复 luyue6453 的帖子+ g( r6 A; `" ]/ i" h

  L# t2 H* v/ j6 }- K; |  I) A我们一般都是5天换一次液的，第一次换液组织块贴壁的很少，多数随培养液一起倒出离心去上清，用培养液重悬倒回原培养瓶；第十天第二次换液，第一次换液之后到第二次换液之前尽量不要动（也不要观察），因为该段时间内细胞大量爬出，若移动培养瓶导致贴壁的组织块脱落，不利于细胞爬出。

luyue6453

回复 zhangjieyctc 的帖子) X" C0 S# L: \, R8 x$ @7 _

$ p7 X% U" t; B6 T嗯，好主意，我也试试，离心后把组织块加回去，

孙帅帅

请问什么叫活化啊？