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楼主: rongcuizhen2005
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[请教] 液氮罐内冻存细胞是否会污染?   [复制链接]

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发表于 2014-10-17 10:17 |只看该作者
回复 rongcuizhen2005 的帖子  `' _- u) z4 E5 e& j$ _

$ L) t$ [# U5 x你可以用个PE手套把冻存管套上复苏。或者在冻存的时候就可以加个套子。NUNC公司有相应的冻存管套。
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发表于 2014-10-21 10:27 |只看该作者
液氮罐内污染微生物或者其他细胞系是一个特别常见的问题,因为液氮是流动的,而常用的冻存管,不管内旋外旋,不管拧多紧,都会进液氮,这个我们做过实验的。0 y  U. Q+ D7 q& ~! i$ w! D1 a

6 V! ]5 f( p# U对于珍贵的细胞系,只有两种办法,一种是楼上提到的冻存套管,需要买一个风嘴比较小专门的吹风机;另外一种就是液氮气相保存。
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发表于 2014-10-28 08:49 |只看该作者
液氮罐污染的可能性不大吧,要么是冻存前要么是冻存后污染的,液氮里不可能长菌啊,你可以做个试验啊 ,在复苏一管其他的试试,注意无菌操作 。我以前就做过  ,冻存的细胞检测的时候污染了,但是在液氮里面对其他的没什么影响的,直接拿出来丢掉。
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发表于 2015-2-27 13:01 |只看该作者
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分析原因有:
# v# n! T* {3 W/ Z: e" d1、冻存前细胞样本就已经污染了;7 ]$ D- J$ N% h. _+ g
2、在水浴锅复苏时给污染的;(可能性最大)
% J3 e: V7 `% v+ N3、冻存液污染的几率也是有的,但比前两个几率小很多;
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发表于 2015-3-3 09:03 |只看该作者
我觉得是你冻存前就污染了,因为你的冻存袋和冻存夹也相当于一个隔离,按说就算液氮罐有菌也不能污染样本。
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发表于 2015-3-3 10:21 |只看该作者
有可能是液氮罐内造成的污染,当然冻存前的操作过程以及复苏的过程中都可能造成污染
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发表于 2015-3-3 10:45 |只看该作者
我们实验室的冻存液是血清和DMEM单独过滤后和DMSO混合,DMSO不过滤的
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发表于 2015-3-3 11:28 |只看该作者
液氮罐内污染的可能性不是没有,但是可能性很小,基友可能是你冻存或者是复苏的时候某个环节发生了污染,平时细胞操作的过程中一定要注意保持良好的无菌操作习惯,对于冻存和复苏这样比较关键的步骤,配置试剂的时候最好是都滤膜过滤一遍再使用。
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发表于 2015-4-10 11:00 |只看该作者
虽然液氮渗入冻存管有一定的可能造成污染,但概率很小很小,一般来说污染最大的可能还是冻存前和复苏后。
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发表于 2015-4-10 11:29 |只看该作者
冻存前污染的可能性是最大,相对来说,我要做复苏时都是格外的认真,在液氮中也有隔离,污染的可能性比较小,总的说来都有可能的,每个细节都要严格无菌操作的
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