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[讨论] 关于FICOLL的一些使用分析?大家都是怎样处理的/

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发表于 2012-11-15 09:51 |显示全部帖子
      如果同时分两份脐血,再加完PBS与脐血的混合液后,有的血细胞和粒细胞会沉入FICOLL中,差不多有20分钟,是否会影响单个核细胞的得率?  还有如果PBS与血浆如果低于1:1时,会怎样?  还有 有时候分层时,吸白膜发现有白色团块,像奶粉团块,是什么?
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发表于 2012-11-15 10:01 |显示全部帖子
自然沉降没有影响,要是能一直自然沉降达到分层那就好了,你这个得率肯定高,pbs与血量最好达到1:1否则应该会影响你的得率,白色团块应该是血浆释放的纤连蛋白等网到一起了
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发表于 2012-11-15 10:11 |显示全部帖子
1、得率差异应该差异不大。
( m, v; Q. w& n3 e+ A6 A2、PBS和血浆的比例应该没有明显的限制吧,PBS主要起个稀释作用,我还看到有的资料上讲不用PBS稀释的。血液浓度大,离心时间可能需要稍微长一点或者离心力大一些。  H6 @& l9 w5 I
3、白膜层有团块倒是从来没遇到过,团块很致密吗,如果不致密像旋状物的话应该就是单个核细胞吧,说明分离效果还不错。还有就是脐血会不会采集的时间有点长了,或者是采集时脐血没有与抗凝剂混匀,块状物是些纤维蛋白类物质。
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发表于 2012-11-16 11:04 |显示全部帖子
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PBS与血液的稀释比例、离心时间、转速等参数不是固定不变的,因为血液有个体差异有稠有稀,离心时间和转速也是要结合实验室用的离心机,不同的离心机不同,所以可以参照大家的意见稍作调整,得到最理想的效果。碰到过白膜层下面的一层有白色团块的,有人说是粒细胞,粒细胞不属于单个核细胞(PBMC),它在红细胞层上面经常看到。
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发表于 2012-11-16 11:04 |显示全部帖子
麻烦问下,楼上几位用ficoll,NC得率怎么样?
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发表于 2012-11-19 10:01 |显示全部帖子
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  ]0 S& A6 m1 }3 D6 _0 H5 j- i/ v( t+ p- e* I; n, {5 l
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