干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: ying
go

[请教] 液氮为何会进入冻存管,是否会污染细胞   [复制链接]

Rank: 2

积分
102 
威望
102  
包包
333  
21
发表于 2012-11-17 23:41 |只看该作者
暂时还没用过冻存管,没经验,不过非常非常经常用液氮,所以想到个事情,不知对楼主有没有帮助。
$ ~& |# d2 n7 }; X4 p4 p我做实验的时候,特别是做冻融脱气这种操作的时候,管子是要封好了再丢到液氮里冻,因为好像那么低的温度下气体溶解性大大增加,大量气体就被冻到液体里去了,等拿出来再次溶解的时候,管子里大量气体跑出,压强急剧增大,管子直接就裂了,如果我用瓶子+乳胶管的话,乳胶管就直接随着一声巨响炸掉了。。。。。。。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
404 
威望
404  
包包
9  

金话筒 优秀会员

22
发表于 2012-11-18 12:21 |只看该作者
冻存管我们实验室都先放-80再转液氮
7 ?0 b; `* `& S' o" J, n+ R' i
9 z/ t& d; b6 O3 l受到低温,热涨冷缩,管身缩紧,管口处容易出现缝隙是正常的,可能会有液氮顺着缝隙流入& p7 L& P& {) a- q
$ G$ \# ^0 n7 j7 v9 E9 u
取出冻存管时,温度回升,液氮受热气化,管里的空间有限,如果不能及时排除,就容易挤压管身造成爆炸
: N7 e& H- p$ o* _$ S2 O3 j' O
" h- {+ I! N% i; \" o爆炸后的细胞肯定是找不回来了,正常情况下,只要冻存时注意了无菌操作,及时在复苏时发现有液氮流入,也会很快气化,而且液氮里不会带入细菌,可以放心使用
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
151 
威望
151  
包包
439  

优秀会员

23
发表于 2012-11-19 15:27 |只看该作者
回复 meister 的帖子5 ^1 S" i1 i; x) A4 ~) X# v4 V

+ I, ~, p" D8 x. T7 B) z气相液氮罐一般温度能达到-183到-193之间,一般来说是可以保证的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
20 
威望
20  
包包
148  
24
发表于 2012-11-27 09:53 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我们也是用的nunc的质量还可以,未见有爆炸现象。我们实验室是将细胞放在装有异丙醇的冻存盒放置-80度过夜,第二天放入液氮罐;之所以爆炸,一是冻存管质量,另可能与装量有关。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
417 
威望
417  
包包
2698  

金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

25
发表于 2012-11-27 09:59 |只看该作者
回复 biomater 的帖子4 H' |6 F# A- a" Q. [1 |

0 J  r7 j0 c( p$ F这是个好方法,只要是液相储存都会有液氮进入吧,但进入也不会污染吧,什么微生物可以在没有保护剂的条件下在液氮里存活呢
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
133 
威望
133  
包包
468  
26
发表于 2012-11-27 11:30 |只看该作者
我们之前也有过冻存管爆炸,从液氮中取出冻存管确实能看到管里面有液体在沸腾,后来就用封口膜把管口封了一下,感觉要好很多,这样液氮也不容易进去。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
453 
威望
453  
包包
1070  

金话筒 优秀会员

27
发表于 2012-12-3 09:22 |只看该作者
没用的。温度相差太大。热涨冷缩。会有些变化的。还有就是在复苏的时候要注意。这部是比较关键的。有病人的样本最好放入气相中。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
537 
威望
537  
包包
1526  

金话筒 优秀会员 积极份子

28
发表于 2012-12-3 09:39 |只看该作者
见过corning的管子炸过两次。首先液氮进去,是因为密封性不好,放进液氮,盖子和管子受冷缩的程度不一样,然后液氮就进去了,对策可以慢慢降温,我们是用封口膜。用封口膜要避免反复冻融,不然封口膜会碎的。如果进了液氮,人尽量用罩子防着。之前有人眼镜都被炸碎了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
233 
威望
233  
包包
266  

优秀会员

29
发表于 2012-12-4 19:56 |只看该作者
以前的经验,国内的普通液氮罐建议用外旋管,在国内时我从不用内旋管,内旋管质硬管壁厚,进液氮后容易爆炸,外旋管柔韧性强不易爆。现在的实验室这边细胞和液氮是分开两个容器储存的,冻存管不接触液氮,所以就无所谓了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 4

积分
1343 
威望
1343  
包包
387  

金话筒 优秀会员 热心会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员

30
发表于 2012-12-4 20:32 |只看该作者
回复 ljs 的帖子; Y6 I5 Q, s& B2 k  p3 Z) y

$ l! o7 |9 n! N4 T& M3 b, W污染物也包括很多种,不一定特指病源性污染物,支原体等可以污染细胞,将来在负责的时候,就有可能影响细胞生长,
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-6-18 13:17

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.